Dermaal equivalent. De geschiedenis en resultaten van klinische onderzoeken

Eind jaren tachtig werd een vloeibare vorm van rundercollageen ontwikkeld aan de Stanford University, die bij de lichaamstemperatuur werd omgezet in een zacht elastisch substraat. Het medicijn is geregistreerd en goedgekeurd voor gebruik in verschillende Europese landen als een implanteerbaar geneesmiddel dat Zyderm Collagen Implantant wordt genoemd. Dit medicijn was het eerste implantaat. Later verschenen andere middelen voor contourplastiek, zoals restylaan, peryleen, farmaci- tische gel, artekol, biopolymeergel en andere. Deze medicijnen werden niet alleen gebruikt voor contourmodellering en correctie van leeftijdsgerelateerde veranderingen in de huid, maar ook voor behandeling, of beter gezegd, voor het egaliseren van het reliëf van littekens. Ze werden allemaal in de bodem van de pens geïnjecteerd.

De zoektocht naar betere methoden voor de behandeling van hypotrofe littekens leidde ons naar het idee om voor dit doel een kunstmatig gecreëerde huidanaloog te gebruiken - het "dermalequivalent" (DE), waarin ook vloeibaar collageen werd gebruikt. Varianten van kunsthuid substituten waren veel, maar het idee van het totaal - om de structurele componenten van de dermis vergelijkbaar met het huidweefsel, die niet in het geval van transplantaties zou worden afgewezen en had een goed substraat voor de kieming van zijn eigen onderdelen van de lederhuid en de opperhuid te creëren. Het is bekend dat de fundamentele structurele componenten van de dermis cellulaire, vezelige elementen en interstitiële substantie zijn. Vezelachtige elementen zijn voornamelijk collageen- en elastinevezels, interstitiële substantie - glycoproteïnen, proteoglycanen en glycosaminoglycanen. Het belangrijkste functionele cellulaire element van de dermis is fibroblast, de cellulaire populatie van fibroblasten is de bron van bijna alle structurele componenten van de dermis. Daarom gebruiken de meeste wetenschappers bij het maken van een "skin substitute" een collageen substraat gemengd met fibroblasten en glycosaminoglycanen. Boven de een of andere laag van keratinocyten wordt aangebracht op de huid polnosloynoy maken en sneller herstel van de levensvatbaarheid van de getransplanteerde huidequivalent, die wordt vergemakkelijkt door talrijke keratinocyten uitgescheiden groeifactoren. Een van de eerste varianten van het 'levende equivalent van de huid' werd in 1983 door E.Bell en co-auteurs voorgesteld. Huidfibroblasten werden gemengd met collageen, plasma en groeimedium, hetgeen leidde tot de vorming van een gel op het oppervlak waarvan keratinocyten werden gegroeid. Dit alles werd gedurende 1-2 weken gekweekt in vilro, waarna het dermalequivalent als volgroeid werd beschouwd en een levensvatbaar weefsel was in de vorm van een doorschijnende elastische massa. De auteurs stelden voor om de volledige laagstructuur van de huid over te brengen naar de wondoppervlakken van patiënten met brandwonden. Als basis voor het dermalequivalent gebruikten sommige auteurs een collageenspons of een collageenmatrix gecoat met proteoglycanen en gekoloniseerd met fibroblasten, waarna autologe keratinocyten werden gekweekt. Dientengevolge werd het zogenaamde driedimensionale huidmodel gecreëerd. Voor de kweek van keratinocyten voor daaropvolgend overbrengen naar het wondoppervlak, hebben sommige auteurs ook gebruikt als een kunstmatig substraat matrix van collageen en glycosaminoglycanen chitosan kadaver huid varkenshuid. 7-14 dagen na de start van de kweek werd een volledig ingebracht transplantaat met de dermis en epidermis getransplanteerd naar de wonden van patiënten of dieren.

De kunstmatige huidvervanger werd niet alleen gebruikt om de huid van verbrand te herstellen, maar ook om geneesmiddelen te testen op cytotoxiciteit, om groeifactoren in vitro te bestuderen.

Onvoldoende ons oogpunt van operationele doelmatigheid dermabrasion hypotrophic diepe littekens in combinatie met vervoer IPC gaf aanleiding proberen te lijnen Huidtopografie door enten de uitsparing hypotrophic litteken analoge dermale equivalent. Het substraat voor het creëren van een dermaal equivalent was vloeibaar collageen, verkregen door een laboratoriumroute, waar een suspensie van fibroblasten werd geïntroduceerd. Het huidequivalent, evenals de IPC, is gemaakt in een gespecialiseerd laboratorium dat is gecertificeerd voor deze activiteit en op de dag en het uur van de operatie werd het in een glazen flesje in een ijscontainer aan de kliniek afgeleverd.

Operationele slijpen littekens op gebruikelijke wijze na antiseptische behandeling van de huid en lokale verdoving 2% lidocaïne of novocaine of articaïne uitgevoerd. Door malen werd het oppervlak van de pens geëgaliseerd en werden tegelijkertijd omstandigheden gecreëerd voor het engraferen van gekweekte cellen of celsamenstellingen. Daarna gekoelde vloeibare collageengel geïnoculeerd met fibroblasten werd met een steriele spatel aangebracht op een gepolijst oppervlak van hypotrophic littekens (littekens in de uitsparing) waar het onder invloed van de polymerisatietemperatuur van het lichaam.

Als een resultaat, na 5-10 minuten, van het vloeibare toestand collageen met fibroblasten gepolymeriseerd in een dikke gel toestand. Na het verdikken van DE werd een verband met een suspensie of IPC op het substraat bovenop gelegd.

Een meerlaags steriel verband werd gefixeerd zoals bij de transplantatie van de IPC. Afhankelijk van het oppervlak van het litteken, de wondbedekking waarop de keratinocyten zich bevonden en het soort slijpen, werd het verband binnen 7 tot 12 dagen afgescheurd.

Werkwijzen combinatiebehandeling hypotrophic littekens behulp operationele dermabrasion, gevolgd door overbrenging in een uitsparing pens "dermale equivalent" en keratinocyten in een meerlaags reservoir gekweekt op speciale wond bekledingen of als suspensie, aanzienlijk beter cosmetisch aanvaardbare resultaten met een afname of volledige verdwijning van (verwezenlijken -) doek. Omdat dermale equivalente vormen eigen weefsel (dermis), littekenweefsel blijft onder het nieuw gevormde weefsel. IPC zorgt voor een normale dikte en functionele activiteit van de opperhuid, waardoor de totale uitstraling van het litteken in het de neiging om een aanzienlijke verbetering voor enkele maanden.

Een dergelijke tactiek van behandeling van hypotrofe littekens kan op dit moment optimaal worden genoemd bij het oplossen van dit probleem. De DE-versie die door ons wordt gebruikt in de vorm van een collageengel met fibroblasten die erin zijn geïnoculeerd, is echter niet erg handig in het werk. DE voor werk met hypotrofe littekens moet aanvankelijk dikker zijn, zodat het in de verdieping van het litteken kan worden geplaatst, het kan worden verspreid. Waarna de bovenste wond wordt gewikkeld met keratinocyten. Er kan dus worden gezegd dat deze richting in het werk met hypotrofe littekens alleen gepland is, maar de voorspellingen voor de verdere ontwikkeling en studie ervan zijn zeer optimistisch.

Complexiteit en hoge kosten voor het verkrijgen van meerlagige lagen van keratinocyten, als een therapeutisch materiaal, stimuleerden de noodzaak om te zoeken naar andere varianten van cellulaire samenstellingen. Van groot belang is de onderzoekers het kweken van fibroblasten die, wanneer het transplanteren op het wondoppervlak tot gevolg hebben, in veel opzichten vergelijkbaar met de resultaten van transplantatie van keratinocyten, maar is veel meer eenvoudige en goedkope celmateriaal. In onze studies voerden we verschillende mesotherapiepatiënten met hypotrofe littekens door middel van mesotherapie met behulp van een suspensie van fibroblasten voor littekens.

Suspensie van fibroblasten in een groeimedium met 1,5-2 miljoen cellen per ml. Werd toegediend onder de littekens door mesotherapie-technieken (micropapulmonaal, infiltratief). Het aantal behandelingen van 4 tot 10, afhankelijk van de verjaringstermijn van de pens, de leeftijd van de patiënt en de diepte van het defect. Het interval tussen sessies is 7-10 dagen. In de regel ging de introductie van een suspensie van autologe en allogene fibroblasten gepaard met een lichte, snelstromende vasculaire reactie.

Hierdoor klinische studies is gebleken dat onder invloed van getransplanteerde IPC vermindert de duur van de ontstekingsreactie in de huid en littekens na dermabrasion operationele en versnelling van epithelisatie van wondoppervlakken gemiddeld 3-4 dagen.

Bij het werken met normotrofe en hypertrofische littekens is de versnelling van de genezing van postoperatieve erosies van het grootste belang, omdat hierin de mogelijkheid bestaat om het optimale therapeutische effect te verkrijgen.

Transplantatie van het huidequivalent resulteerde in het vullen van (-) weefsel van hypotrofe littekens, het gladmaken van hun reliëf, het gladmaken met de omringende huid, waardoor het gebied van littekens veel kleiner werd.

De introductie van een suspensie van fibroblasten in hypotrofe littekens leidde ook tot een egalisatie van het reliëf van de huid en een vermindering van het gebied van de littekens.

In alle gevallen van transplantatie van cellulair materiaal werd het effect van nawerking opgemerkt, wanneer gedurende enkele maanden een verbetering in het esthetische uiterlijk van de littekens optrad, die de neiging had een dermoidachtige structuur te worden.

Alle door ons waargenomen effecten houden verband met de realisatie van het biostimulerend vermogen door getransplanteerde cellen. Niet de minste rol, zoals het ons lijkt, is dat het aantal cellagen in transplantaten in de regel 10-30% hoger is. Bijgevolg is de totale cellulaire potentiaal per oppervlakte-eenheid al 10-30% hoger dan normaal. Bovendien werden de beste resultaten bij de transplantatie van keratinocyten en fibroblasten verkregen door het celmateriaal van jonge gezonde mensen te transplanteren. Dit feit spreekt trouwens ten gunste van het gebruik van allogene culturen verkregen van jonge en gezonde donoren. Bioenergetisch en informatiepotentieel van een dergelijke cultuur wordt doorgegeven aan zijn eigen cellen, soms zeer jonge ontvangers, door wat de "kwaliteit" van hun eigen weefsels en cellen verbetert.

Aldus maakt de toepassing van de cultuur van keratinocyten en fibroblasten het volgende mogelijk:

• Versnel epithelisatie van littekens na dermabrasie.
• Verminder het uiterlijk van littekens, niet alleen vanwege de uitlijning van hun oppervlak met het oppervlak van de omliggende huid, maar ook vanwege de vorming van een volledige opperhuid daarover.
• Om de resultaten van operatieve dermabrasie te verbeteren door het effect van cytokines van getransplanteerde cellen op het litteken, dat uiteindelijk de neiging heeft om te transformeren in een huidachtige structuur.
• Om esthetisch veel acceptabelere resultaten te verkrijgen van de behandeling van patiënten met normotrofe, hypotrofe, hypertrofische, atrofische littekens en striae.

[1], [2], [3], [4], [5], [6], [7], [8], [9], [10], [11]