Hepatitis E-virus

Het hepatitis E-virus (HEV) is bolvormig, heeft een diameter van 27-34 nm, de nucleocapsidesymmetrie is icosahedraal en er is geen buitenmembraan.

Het hepatitis E-virus werd geïdentificeerd in de ontlasting van patiënten die niet-A-, niet-B-virale hepatitis hadden via de enterale infectieroute, en ook in de ontlasting van proefdieren (apen) die besmet waren met hetzelfde virusbevattende materiaal. Hierbij werd gebruikgemaakt van immuun-elektronenmicroscopie (IEM) waarbij gebruik werd gemaakt van serum van herstelde patiënten van deze hepatitis.

Tot op heden is vastgesteld dat het hepatitis E-virus de volgende fysisch-chemische en biologische kenmerken heeft.

• Morfologisch gezien wordt het virus vertegenwoordigd door bolvormige deeltjes zonder schil; hun oppervlak vertoont pieken en dalen; het virus desintegreert wanneer het wordt blootgesteld aan CS CL, bevriest/ontdooit en blijft bewaard bij -20 °C.
• De diameter van virusdeeltjes bedraagt 32 tot 34 nm.
• Het genoom bestaat uit 7,5 kb lang, enkelstrengs, gepolyadenyleerd RNA.
• De sedimentatiecoëfficiënt is 183 S (voor defecte virusachtige deeltjes - 165 S). De drijfdichtheid is 1,29 g/cm3 ⁱⁿ de KTa/Glu-gradiënt.
• In vitro-kweek was niet succesvol.
• Intracerebrale toediening van een suspensie van fecaal extract dat HEV-deeltjes bevat aan zogende muizen leidt niet tot ziekte bij de muizen.

Met behulp van moleculair klonen werden grote hoeveelheden HEV verkregen uit de gal van geïnfecteerde makaken. De identiteit van virusdeeltjes, verkregen uit fecale extracten van hepatitis E-patiënten in verschillende delen van de wereld (Somalië, Borneo, Pakistan, Centraal-Azië, enz.), werd aangetoond. De structuur van het HEV-genoom werd praktisch ontrafeld. Door analyse van de nucleotidesequenties en de genoomorganisatie werd vastgesteld dat HEV verschilt van picornavirussen en niet tot de calicivirussen (calicivirussen) kan behoren, zoals aanvankelijk werd aangenomen.

Het genoom bestaat uit een enkelstrengs, niet-gefragmenteerd, positief RNA van 7500 basen, dat drie open leesramen bevat die coderen voor virusspecifieke eiwitten. Op het oppervlak van het virion bevinden zich holtes die lijken op bekers (Griekse kelk), waardoor het virus aanvankelijk werd ingedeeld bij de familie Caliciviridae (geslacht Hepavirus). Een meer gedetailleerde studie van het HEV-genoom toonde aan dat de nucleotidesequentie van het RNA uniek is en slechts enige gelijkenis vertoont met die van het rubellavirus.

HEV wordt momenteel geclassificeerd als lid van de familie Hepereviridae, het geslacht Heperevirus en het hepatitis E-virus.

HEV-antigeen(en) - HEV-Ag werd geïdentificeerd op het oppervlak van virusdeeltjes met behulp van immuunelektronenmicroscopie, en in hepatocyten met behulp van immunohistochemische methoden. Bij proefdieren (makaken en chimpansees) met hepatitis E werd HEV-Ag gedetecteerd in het cytoplasma van hepatocyten met behulp van de immunofluorescentiemethode, waarbij levercoupes werden gecombineerd met sera van dezelfde dieren, verkregen tijdens de herstelperiode. De specificiteit van HEV-Ag werd vervolgens bevestigd in absorptiestudies met behulp van recombinante eiwitten, verkregen door het klonen van het HEV-genoom.

In immunomorfologische studies bij met hepatitis E geïnfecteerde apen werden granulaire afzettingen van HEV-Ag gelokaliseerd in het cytoplasma van hepatocyten. De granules die HEV-Ag bevatten, waren willekeurig gelokaliseerd en het aantal granules varieerde significant in verschillende cellen. Er werd geen preferentiële lokalisatie van HEV-Ag-positieve hepatocyten in een specifieke zone van de leverkwab gedetecteerd. Hepatitis met HEV-Ag werd constant gedetecteerd vóór de toename van de ALT-activiteit, bleef vervolgens aanwezig gedurende de gehele periode van hyperenzymemie en verdween vrijwel volledig na normalisatie van de ALT-activiteit.

HEV-genomische sequenties werden geïdentificeerd in de ontlasting, gal en het bloedserum van patiënten met hepatitis E bij mensen en proefdieren (apen); de humorale immuunreactie werd bestudeerd vanaf de acute fase van de ziekte tot aan het herstel.

De hoogste concentratie HEV-deeltjes werd aangetroffen in de gal van geïnfecteerde makaken vóór de piek van ALT-activiteit in het infectiestadium, toen de piek van HEV-Ag in de lever werd gemeten.

HEV-RNA is aangetroffen in fecale, gal- en serummonsters van geïnfecteerde mensen en primaten.

De aanwezigheid van specifieke antilichamen (anti-HEV) in het bloedserum van patiënten met hepatitis E bij mensen en proefdieren werd vastgesteld met behulp van immuun-elektronenmicroscopie en de fluorescerende antilichaammethode met behulp van HEV-deeltjespreparaten of leversecties die HEV-Ag als substraat bevatten.

Verdere cross-sectionele onderzoeken van HEV-isolaten en herstellende sera afkomstig van patiënten in verschillende geografische gebieden waar uitbraken of sporadische gevallen van hepatitis E voorkwamen, evenals HEV-deeltjes en sera afkomstig van primaten die met deze isolaten waren geïnfecteerd, overtuigden de onderzoekers er uiteindelijk van dat er wereldwijd één enkel virus (of klasse van serologisch verwante virussen) verantwoordelijk is voor hepatitis E.

De genotypische diversiteit van HEV wordt getoond. Er werden acht genotypes van het virus geïdentificeerd, waarvan de belangrijkste prototypes de volgende isolaten waren: genotype 1 - HEV-isolaat uit Birma, 2 - uit Mexico, 3 - uit de VS, 4 - uit Taiwan en China, 5 - uit Italië, 6 - uit Griekenland, 7 - uit Griekenland (tweede isolaat), 8 - uit Argentinië.

Uit onderzoek is gebleken dat in de acute fase van hepatitis E bij makaken en chimpansees de anti-HEV-klassen IgM en IgG in het bloedserum circuleren, terwijl in de sera van de herstelperiode alleen de anti-HEV-klassen circuleren.

Uit een aantal onderzoeken is gebleken dat bij 73% van de patiënten met hepatitis E in de eerste 26 dagen na aanvang van de geelzucht anti-HEV IgM is aangetroffen. Tijdens de herstelperiode is bij 90% van de patiënten anti-HEV IgG aangetroffen.

De bron van infectie is alleen de mens; de ziekteverwekker wordt uitgescheiden via de ontlasting. Het infectiemechanisme is fecaal-oraal. De belangrijkste infectieroute is via met ontlasting verontreinigd water. De infectiedosis is aanzienlijk hoger dan die van het hepatitis A-virus. De vatbaarheid voor het HEV-virus is universeel. Epidemieën kunnen tienduizenden mensen treffen als het drinkregime wordt overtreden, vooral tijdens seizoensarbeid in de zomer en herfst.

Klinisch gezien verloopt hepatitis E milder dan hepatitis A, en een overgang naar een chronische vorm is niet waargenomen. Bij 85-90% van de patiënten verloopt hepatitis E mild of matig, vaak asymptomatisch. Bij zwangere vrouwen verloopt hepatitis E echter ernstig, met een sterftecijfer tot 20%.

Immuun-elektronenmicroscopie wordt gebruikt voor diagnostiek; er is een testsysteem voorgesteld voor het detecteren van antilichamen tegen HEV-antigenen. De immuniteit na infectie is sterk en levenslang, dankzij virusneutraliserende antilichamen en immuungeheugencellen. Een vaccin met een heel virion is voorgesteld voor specifieke profylaxe, en er zijn levende en recombinante vaccins in ontwikkeling.

[ 1 ], [ 2 ], [ 3 ], [ 4 ], [ 5 ], [ 6 ], [ 7 ], [ 8 ], [ 9 ]