Infectieuze mononucleosis: antilichamen tegen het Epstein-Barr-virus in het bloed

Infectieuze mononucleosis is een veel voorkomende systemische lymfoproliferatieve ziekte, meestal veroorzaakt door het Epstein-Barr-virus. Toxoplasma gondii en andere virussen (CMV, humaan immunodeficiëntievirus en humaan herpesvirus type 6, erkend als de oorzaak van plotselinge exantheem) kunnen klinisch vergelijkbare ziekten veroorzaken. Het is waarschijnlijk dat deze zelfde etiologische middelen de ontwikkeling van chronisch vermoeidheidssyndroom kunnen veroorzaken.

Epstein-Barr-virus is een virus van de herpesgroep, heeft een tropisme voor B-lymfocyten, persistent persisteert in de gastheercellen als een latente infectie. Het is wijd verspreid over de hele wereld. Door structuur en grootte is het Epstein-Barr-virus niet te onderscheiden van andere herpesvirussen, maar verschilt het significant van hen in antigene eigenschappen. Het virus heeft een membraanantigeen (MA-membraanantigeen), een nucleair antigeen (EBNA-Epstein-Barris-nucleïne-antigeen) en een viraal capsid-antigeen (VCA).

Infectie treedt op wanneer het virus wordt overgedragen met speeksel. Het Epstein-Barr-virus infecteert, wanneer het wordt ingenomen, het pharyngeale epitheel en veroorzaakt ontsteking en koorts-typische klinische tekenen van het begin van infectieuze mononucleosis. Strikt lymfotroop virus, verbinden S3α receptor celmembraan van B-lymfocyten induceert proliferatie van polyklonale B-lymfocyten met een overeenkomstige verhoging van de amandelen, systemische lymfadenopathie en splenomegalie. B-lymfocyten worden omgezet (verwerven het vermogen om oneindig afdeling) en bij afwezigheid van een adequate cellulaire immuunrespons, kan deze werkwijze uiteraard maligne (bijvoorbeeld X-gebonden lymfoproliferatieve syndroom) ontwikkelen. Als de cellulaire immuniteitsfactoren de replicatie van het Epstein-Barr-virus in het lichaam reguleren, verdwijnen de klinische symptomen van infectieuze mononucleosis geleidelijk.

Zoals andere herpesvirussen kan Epstein-Barr virus volharden in een latente infectie (het DNA in de kern van een kleine hoeveelheid B-lymfocyten). Episodische asymptomatische reactivatie van infectie - een veel voorkomend verschijnsel, ongeveer 20% van gezonde jonge mensen scheiden het virus Epstein-Barr-virus met speeksel. Bij personen met een beschadigde cellulaire immuniteit (bv AIDS, ataxie-telangiectasia, in transplantatie ontvangers) kan een duidelijke reactief infectie met harige leukoplakie, interstitiële pneumonitis, of in de vorm van een monoklonale B-cellymfoom te ontwikkelen. Met Epstein-Barr-virus wordt geassocieerd etiologie van nasofarynxcarcinoom en Burkitt lymfoom.

Een van de manifestaties van infectieuze mononucleosis is het uiterlijk in het perifere bloed van atypische lymfocyten (tot 10% van het totale aantal lymfocyten). Atypische lymfocyten worden in het bloed aangetroffen vanaf het begin van de periode van klinische manifestaties van infectie. Hun inhoud in het bloed bereikt een piek aan het einde van de 2e of het begin van de 3e week en kan op dit niveau tot 1,5-2 maanden standhouden, complete verdwijning treedt meestal op tegen het begin van de 4e maand na het begin van de ziekte. De aanwezigheid van atypische lymfocyten is een relatief ongevoelig teken van infectie veroorzaakt door het Epstein-Barr-virus, maar heeft een totale specificiteit van ongeveer 95%.

Proliferatie van polyklonale B-lymfocyten bij infectie met Epstein-Barr virus, genereert een grote verscheidenheid aan auto-antilichamen in de patiënt, zoals IgM-anti-i (koud agglutinine), reumatoïde factor, antinucleaire antilichamen. De meeste ongebruikelijke van Ig, te zien zijn in de ziekte van Pfeiffer, worden genoemd heterofiele antilichamen Paul-Bunnelya. Deze antilichamen behoren tot de klasse IgM, hebben ze een affiniteit voor lamsvlees en paard rode bloedcellen, zijn niet gericht aan een antigeen Epstein-Barr-virus. Heterofiele antilichamen - Willekeurige producten B-lymfocyten proliferatie (veroorzaakt door het Epstein-Barr virus), verschijnen ze in de eerste week van de ziekte van Pfeiffer en geleidelijk verdwijnen tijdens de herstelperiode, zijn ze meestal niet gedetecteerd in 3-6 maanden.

Naarmate het initiële acute stadium van infectie latent wordt, verschijnen de genomen van het Epstein-Barr-virus (unieke antigenen) in grote aantallen in alle cellen en wordt het nucleaire antigeen in de omgeving vrijgegeven. Als reactie op het antigeen worden specifieke antilichamen gesynthetiseerd - waardevolle markers van het ziektestadium. Kort na infectie van B-lymfocyten wordt een vroeg antigeen (EA) gedetecteerd, een eiwit dat vereist is voor replicatie van het Epstein-Barr-virus (en geen structurele virale component). Aan het vroege antigeen in het lichaam van de patiënt worden antilichamen van klassen IgM en IgG gesynthetiseerd. Samen met het volledige virus van het Epstein-Barr-virus verschijnen antigenen van het virale capside (VCA) en membraanantigeen (MA). Naarmate het infectieuze proces verdwijnt, vermijdt een klein percentage B-lymfocyten die zijn geïnfecteerd met het Epstein-Barr-virus immuunvernietiging en behoudt het virale genoom in een latente vorm. Het nucleaire antigeen (EBNA) van het Epstein-Barr-virus is verantwoordelijk voor de duplicatie en overleving.

Laboratoriumtests kunnen antilichamen tegen verschillende antigenen detecteren.

Van de serologische methoden voor het diagnosticeren van infectieuze mononucleosis is de Paul-Bunnel (agglutinatie) -reactie het meest gebruikelijk, gericht op het detecteren van heterofiele antilichamen in serum. De titer van heterofiele antilichamen 1: 224 en hoger in het serum van de patiënt wordt herkend als diagnostisch significant, wat de diagnose van infectieuze mononucleosis bevestigt. Heterofiele agglutinatie is positief bij 60% van de jongeren na 2 weken en 90% na 4 weken vanaf het begin van klinische manifestaties van de ziekte. Daarom zijn verschillende onderzoeken nodig om infectieuze mononucleosis te diagnosticeren: tijdens de eerste week van de ziekte (de reactie kan negatief zijn) en 1-2 weken later (de reactie kan positief worden). Het gehalte aan heterofiele antilichamen neemt af na het einde van de acute periode van het infectieuze proces, maar hun titer kan binnen 9 maanden na het begin van de klinische symptomen worden bepaald. De Paul-Bunnel-reactie kan van positief in negatief veranderen, zelfs tegen de achtergrond van resterende hematologische en klinische symptomen bij de patiënt. De gevoeligheid van de methode bij volwassenen is 98%, specificiteit is 99%. Bij kinderen met infectieuze mononucleosis vóór de leeftijd van 2 jaar kunnen heterofiele antilichamen alleen bij 30% van de patiënten worden gedetecteerd, op de leeftijd van 2-4 jaar - bij 75%, gedurende 4 jaar - bij meer dan 90%. De gevoeligheid van de methode bij kinderen is minder dan 70%, de specificiteit is 20%. Reductie en vervolgens opnieuw verhogen van de titer van heterofiele antilichamen kan optreden als reactie op een andere infectie (meestal bij virale infecties van de bovenste luchtwegen). De Paul-Bunnel-reactie is niet specifiek voor het Epstein-Barr-virus. De titer van heterofiele antilichamen geeft geen kruisreactie en correleert niet met specifieke antilichamen tegen het Epstein-Barr-virus, noch correleert het met de ernst van het ziekteverloop. De test is nutteloos voor het diagnosticeren van de chronische vorm van infectieuze mononucleosis (alleen positief bij 10% van de patiënten).

Titels 1:56 of minder kunnen worden gevonden bij gezonde mensen en bij patiënten met andere ziekten (reumatoïde artritis, rubella). Er worden zeer zelden valse positieve testresultaten behaald.

Momenteel wordt de methode van "single spot" (diaagglutinatie) gebruikt om antilichamen tegen erytrocyten van een ram te bepalen, deze wordt in eerste instantie gebruikt als screeningstest. Door gevoeligheid is het vergelijkbaar met de Paul-Bunnel-reactie. 5-7% van de gevallen - dia vals positieve tests ongeveer 2% van de studies (leukemie, maligne lymfoom, malaria, rode hond, hepatitis, carcinoom van de pancreas) en vals-negatieve volwassenen.

Opgemerkt moet worden dat het spectrum van diagnostische testsystemen geproduceerd door bedrijven op basis van de bepaling van antilichaamtiter erg breed is, dus het is noodzakelijk om te focussen op de diagnostische titer van antilichamen gespecificeerd in de instructies voor testsystemen.

Als heterofiele antilichamen niet geïdentificeerd en ziektebeeld komt overeen met infectieuze mononucleosis, moet serum specifieke antilichamen van het IgM en IgG onderzoeken. Voor de detectie van specifieke antilichamen tegen het Epstein-Barr virus middels indirecte immunofluorescentie methoden (laten antilichamen tegen VCA- en EA-antigenen te detecteren) antialexin immunofluorescentie (detecteert antilichamen tegen EA, VCA en EBNA-antigeen) en IFA.

Antilichamen tegen de EA-antigeen-D-component (anti-EA-D) verschijnen zelfs in de latente periode van de primaire infectie en verdwijnen snel met herstel.

Antilichamen tegen de EA-antigeen-R-component (anti-EA-R) kunnen 3-4 weken na de klinische manifestaties van de ziekte worden gedetecteerd. Ze houden ongeveer een jaar aan in het bloedserum, vaak gedetecteerd met atypische of langdurige stromen van infectieuze mononucleosis. Gewoonlijk worden deze antilichamen aangetroffen met Burkitt's lymfoom.

Antilichamen tegen IgM van de VCA-klasse (anti-VCA-IgM) verschijnen zeer vroeg, gewoonlijk tot klinische symptomen, ze worden gedetecteerd bij het begin van de ziekte in 100% van de gevallen. Hoge titers komen voor op de 1-6e week na het begin van de infectie, ze beginnen te dalen vanaf de 3e week en verdwijnen meestal na 1-6 maanden. Anti-VCA IgM is bijna altijd aanwezig in het serum met actieve infectie, dus de methode van detectie is zeer gevoelig en specifiek voor een acute episode van infectieuze mononucleosis.

Antilichamen tegen VCA klasse IgG (anti-VCA IgG) kunnen vroeg verschijnen (in de 1-4e week), hun hoeveelheid bereikt een hoogtepunt tegen de 2e maand van de ziekte. Aan het begin van de ziekte worden ze in 100% van de gevallen aangetroffen. Slechts 20% van de patiënten vertoonde een 4-voudige toename van de titer in de studie van gepaarde sera. De titer neemt af bij herstel, maar wordt binnen enkele jaren na de overgedragen infectie gevonden, daarom is het nutteloos voor de diagnose van infectieuze mononucleosis. De aanwezigheid van anti-VCA IgG duidt op een toestand na infectie en immuniteit.

Antilichamen tegen EBNA (anti-EBNA) verschijnen later dan alle, zijn zelden aanwezig in de acute fase van de ziekte. Hun inhoud neemt toe tijdens de herstelperiode (binnen 3-12 maanden), ze kunnen vele jaren na de ziekte in het bloed blijven bestaan. Het ontbreken van anti-EBNA in de aanwezigheid van anti-VCA IgM en anti-EA IgM duidt op een huidige infectie. De detectie van anti-EBNA na een eerdere negatieve reactie duidt op een bestaande infectie. Wanneer de ELISA-methode wordt gebruikt, is het mogelijk om gelijktijdig de aanwezigheid van anti-EBNA-klassen van IgM en IgG te detecteren. Als de hoeveelheid anti-EBNA-IgM groter is dan het anti-EBNA-IgG, moet een acute infectie worden overwogen, waarbij de omgekeerde relatie de vorige is.

In het voordeel van een acute primaire infectie, duiden een of meer van de volgende symptomen op de aanwezigheid van:

• anti-VCA-IgG (vroegtijdig gedetecteerd en later de inhoud verminderd);
• Hoge titer (meer dan 1: 320) of 4-voudige verhoging van de titer van anti-VCA IgG tijdens het verloop van de ziekte;
• een voorbijgaande stijging van de titer van anti-EA-D (1:10 of meer);
• vroege anti-VCA IgG zonder anti-EBNA en later - de opkomst van anti-EBNA.

Acute of primaire infectie veroorzaakt door het Epstein-Barr-virus is uitgesloten als de anti-VCA IgG- en anti-EBNA-titers in het serum niet veranderen bij testen in de dynamiek (acute periode en herstel).

De constante aanwezigheid van vroeg antigeen en anti-VCA IgG in hoge titers duidt op een chronische fase van infectie.

De detectie van antilichamen tegen het Epstein-Barr-virus wordt gebruikt voor het diagnosticeren van infectieuze mononucleosis en chronische infecties veroorzaakt door het Epstein-Barr-virus.

Antilichamen tegen het Epstein-Barr virus kan worden gedetecteerd in de volgende ziekten: secundaire immunodeficiëntie, zoals HIV-infectie, nasofarynxcarcinoom, Burkitt lymfoom, CMV-infectie, syfilis, ziekte van Lyme, brucellose, en anderen.

[1], [2], [3], [4], [5], [6], [7]