Infectieuze mononucleose: antilichamen tegen Epstein-Barr virus in bloed

Infectieuze mononucleosis is een veelvoorkomende systemische lymfoproliferatieve aandoening die meestal wordt veroorzaakt door het Epstein-Barr-virus. Toxoplasma gondii en andere virussen (CMV, humaan immunodeficiëntievirus en humaan herpesvirus type 6, bekend als de veroorzaker van plotselinge exantheem) kunnen klinisch vergelijkbare ziekten veroorzaken. Dezezelfde verwekkers kunnen vermoedelijk de ontwikkeling van het chronisch vermoeidheidssyndroom veroorzaken.

Het Epstein-Barr-virus is een herpesvirus met een tropisme voor B-lymfocyten en blijft lange tijd in gastheercellen aanwezig als een latente infectie. Het is wereldwijd wijdverspreid. Qua structuur en grootte is het Epstein-Barr-virus niet te onderscheiden van andere herpesvirussen, maar het verschilt aanzienlijk van andere herpesvirussen in antigene eigenschappen. Het virus heeft een membraanantigeen (MA - membraanantigeen), een nucleair antigeen (EBNA - Epstein-Barr-nucleïnezuurantigeen) en een antigeen van de virale capside (VCA - viruscapside-antigeen).

Infectie treedt op wanneer het virus via speeksel wordt overgedragen. Wanneer het Epstein-Barr-virus het lichaam binnendringt, infecteert het het epitheel van de keelholte, wat ontsteking en koorts veroorzaakt – typische klinische symptomen van infectieuze mononucleosis infectiosa. Het virus is strikt lymfotroop en hecht zich aan de C3α-receptor van het celmembraan van B-lymfocyten. Het veroorzaakt proliferatie van polyklonale B-lymfocyten met een overeenkomstige toename van het aantal amandelen, systemische lymfadenopathie en splenomegalie. B-lymfocyten transformeren (krijgen het vermogen om zich eindeloos te delen) en bij afwezigheid van een adequate cellulaire immuunrespons kan dit proces evolueren tot een duidelijk kwaadaardig proces (bijvoorbeeld bij het X-gebonden lymfoproliferatief syndroom). Als cellulaire immuunfactoren de replicatie van het Epstein-Barr-virus in het lichaam reguleren, verdwijnen de klinische symptomen van infectieuze mononucleosis geleidelijk.

Net als andere herpesvirussen kan EBV blijven bestaan als een latente infectie (het DNA bevindt zich in de kern van een klein aantal B-lymfocyten). Incidentele asymptomatische reactivatie van de infectie komt vaak voor, waarbij ongeveer 20% van de gezonde jongvolwassenen EBV uitscheidt in het speeksel. Personen met een verminderde cellulaire immuniteit (bijv. aids, ataxia-telangiectasia, transplantatiepatiënten) kunnen een openlijke reactieve infectie ontwikkelen met harige leukoplakie, interstitiële pneumonitis of monoklonaal B-cellymfoom. EBV is in verband gebracht met de etiologie van nasofarynxcarcinoom en Burkitt-lymfoom.

Een van de verschijnselen van infectieuze mononucleosis is het verschijnen van atypische lymfocyten in het perifere bloed (tot 10% van het totale aantal lymfocyten). Atypische lymfocyten worden vanaf het begin van de periode van klinische manifestaties van de infectie in het bloed gedetecteerd. Hun bloedgehalte bereikt een piek aan het einde van de tweede of het begin van de derde week en kan tot 1,5 tot 2 maanden op dit niveau blijven; ze verdwijnen meestal volledig aan het begin van de vierde maand na het begin van de ziekte. De aanwezigheid van atypische lymfocyten is een relatief ongevoelig teken van een infectie met het Epstein-Barr-virus, maar heeft een algemene specificiteit van ongeveer 95%.

De proliferatie van polyklonale B-lymfocyten tijdens de infectie veroorzaakt door het Epstein-Barr-virus genereert een groot aantal verschillende auto-antilichamen in het lichaam van de patiënt, zoals IgM anti-i (koude agglutinine), reumafactor en antinucleaire antilichamen. De meeste ongebruikelijke Ig-antilichamen die bij infectieuze mononucleosis voorkomen, worden Paul-Bunnell heterofiele antilichamen genoemd. Deze antilichamen behoren tot de IgM-klasse, hebben affiniteit voor erytrocyten van schapen en paarden en zijn niet gericht tegen Epstein-Barr-virusantigenen. Heterofiele antilichamen zijn een willekeurig product van B-lymfoïde proliferatie (veroorzaakt door het Epstein-Barr-virus). Ze verschijnen in de eerste week van infectieuze mononucleosis en verdwijnen geleidelijk tijdens het herstel; ze worden meestal pas na 3-6 maanden gedetecteerd.

Naarmate de eerste acute fase van de infectie latent wordt, verschijnen de genomen van het Epstein-Barr-virus (unieke antigenen) in grote hoeveelheden in alle cellen en komt het nucleaire antigeen vrij in de omgeving. Als reactie op het antigeen worden specifieke antilichamen aangemaakt – waardevolle markers van het stadium van de ziekte. Kort na de infectie detecteren B-lymfocyten een vroeg antigeen (EA), een eiwit dat nodig is voor de replicatie van het Epstein-Barr-virus (en geen structurele virale component). Antilichamen van de IgM- en IgG-klassen worden in het lichaam van de patiënt aangemaakt tegen het vroege antigeen. Samen met het volledige Epstein-Barr-virusvirion verschijnen virale capside-antigenen (VCA) en membraanantigeen (MA). Naarmate het infectieproces afneemt, voorkomt een klein percentage van de met het Epstein-Barr-virus geïnfecteerde B-lymfocyten immuundestructie en behoudt het virale genoom in een latente vorm. Het nucleaire antigeen van het Epstein-Barr-virus (EBNA) is verantwoordelijk voor de duplicatie en overleving ervan.

Met laboratoriumtests kunnen antilichamen tegen verschillende antigenen worden opgespoord.

Van de serologische methoden voor de diagnose van infectieuze mononucleosis infectiosa is de Paul-Bunnell-reactie (agglutinatie) de meest voorkomende. Deze methode is gericht op het identificeren van heterofiele antilichamen in het serum. Een titer van heterofiele antilichamen van 1:224 of hoger in het bloedserum van de patiënt wordt als diagnostisch significant beschouwd en bevestigt de diagnose van infectieuze mononucleosis. Heterofiele agglutinatie is positief bij 60% van de jongeren na 2 weken en bij 90% na 4 weken na het begin van de klinische manifestaties van de ziekte. Om infectieuze mononucleosis te diagnosticeren, zijn daarom verschillende onderzoeken nodig: in de eerste week van de ziekte (de reactie kan negatief zijn) en na 1-2 weken (de reactie kan positief worden). Het gehalte aan heterofiele antilichamen neemt af aan het einde van de acute periode van het infectieuze proces, maar hun titer kan binnen 9 maanden na het begin van de klinische symptomen worden bepaald. De Paul-Bunnell-reactie kan van positief naar negatief omslaan, zelfs tegen de achtergrond van resterende hematologische en klinische symptomen bij de patiënt. De gevoeligheid van de methode bij volwassenen is 98%, specificiteit - 99%. Bij kinderen met infectieuze mononucleosis (mononucleosis infectiosa) jonger dan 2 jaar worden heterofiele antilichamen slechts bij 30% van de patiënten gedetecteerd, op de leeftijd van 2-4 jaar - bij 75%, en ouder dan 4 jaar - meer dan 90%. De gevoeligheid van de methode bij kinderen is minder dan 70%, specificiteit - 20%. Een afname en vervolgens een herhaalde toename in de titer van heterofiele antilichamen kan optreden als reactie op een andere infectie (meestal bij virale infecties van de bovenste luchtwegen). De Paul-Bunnell-reactie is niet specifiek voor het Epstein-Barr-virus. De titer van heterofiele antilichamen vertoont geen kruisreactie en correleert niet met specifieke antilichamen tegen het Epstein-Barr-virus; er is ook geen correlatie met de ernst van de ziekte. De test is nutteloos voor de diagnose van chronische infectieuze mononucleosis (gemiddeld is de test slechts bij 10% van de patiënten positief).

Titers van 1:56 en lager kunnen worden gevonden bij gezonde mensen en bij patiënten met andere ziekten (reumatoïde artritis, rodehond). Vals-positieve testresultaten zijn zeer zeldzaam.

Momenteel wordt de "single spot"-methode (slide-agglutinatie) gebruikt om antistoffen tegen rode bloedcellen van schapen te bepalen; deze wordt in eerste instantie gebruikt als screeningstest. Qua gevoeligheid is deze vergelijkbaar met de Paul-Bunnell-reactie. Slide-tests kunnen in ongeveer 2% van de onderzoeken vals-positief zijn (bij leukemie, maligne lymfoom, malaria, rodehond, virale hepatitis, alvleesklierkanker) en vals-negatief bij volwassenen - in 5-7% van de gevallen.

Opgemerkt dient te worden dat het scala aan diagnostische testsystemen die door bedrijven worden geproduceerd op basis van de bepaling van antilichaamtiters, zeer breed is. Daarom is het noodzakelijk om u te richten op de diagnostische antilichaamtiter die in de instructies voor de testsystemen wordt aangegeven.

Indien er geen heterofiele antilichamen worden gedetecteerd en het klinische beeld van de ziekte overeenkomt met die van infectieuze mononucleosis, is onderzoek van het bloedserum noodzakelijk op specifieke antilichamen van de IgM- en IgG-klasse. Om specifieke antilichamen tegen het Epstein-Barr-virus te detecteren, worden indirecte immunofluorescentiemethoden gebruikt (waarmee antilichamen tegen EA- en VCA-antigenen kunnen worden gedetecteerd), anticomplementimmunofluorescentie (detectie van antilichamen tegen EA-, VCA- en EBNA-antigenen) en ELISA.

Antilichamen tegen het EA-antigeen D-component (anti-EA-D) verschijnen zelfs tijdens de latente periode van de primaire infectie en verdwijnen snel na herstel.

Antilichamen tegen de EA-antigeen R-component (anti-EA-R) kunnen 3-4 weken na klinische manifestaties van de ziekte worden gedetecteerd. Ze blijven ongeveer een jaar in het bloedserum aanwezig en worden vaak gedetecteerd bij atypische of langdurige infectieuze mononucleosis infectiosa. Deze antilichamen worden meestal aangetroffen bij het Burkitt-lymfoom.

Antilichamen tegen VCA-klasse IgM (anti-VCA IgM) verschijnen zeer vroeg, meestal vóór klinische symptomen, en worden in 100% van de gevallen direct aan het begin van de ziekte gedetecteerd. Hoge titers treden 1-6 weken na het begin van de infectie op, beginnen vanaf de derde week af te nemen en verdwijnen meestal na 1-6 maanden. Anti-VCA IgM zijn bijna altijd aanwezig in het serum tijdens een actieve infectie, waardoor de detectiemethode zeer gevoelig en specifiek is voor een acute episode van infectieuze mononucleosis infectiosa.

Antilichamen tegen VCA-klasse IgG (anti-VCA IgG) kunnen vroeg verschijnen (na 1-4 weken), hun aantal bereikt een piek in de tweede maand van de ziekte. Aan het begin van de ziekte worden ze in 100% van de gevallen gedetecteerd. Slechts 20% van de patiënten vertoont een viervoudige titerverhoging bij onderzoek van gepaarde sera. De titer daalt tijdens het herstel, maar is nog enkele jaren na de infectie aantoonbaar en is daarom niet bruikbaar voor de diagnose van mononucleosis infectiosa. De aanwezigheid van anti-VCA IgG geeft de toestand na de infectie en de immuniteit aan.

Antilichamen tegen EBNA (anti-EBNA) verschijnen als laatste en zijn zelden aanwezig in de acute fase van de ziekte. Hun gehalte neemt toe tijdens de herstelperiode (binnen 3-12 maanden) en kan nog vele jaren na de ziekte in het bloed aanwezig blijven. De afwezigheid van anti-EBNA in aanwezigheid van anti-VCA IgM en anti-EA IgM wijst op een actuele infectie. Detectie van anti-EBNA na een eerdere negatieve reactie wijst op een bestaande infectie. Met behulp van de ELISA-methode is het mogelijk om gelijktijdig de aanwezigheid van anti-EBNA-klassen IgM en IgG te bepalen. Als de hoeveelheid anti-EBNA IgM groter is dan de hoeveelheid anti-EBNA IgG, moet een acute infectie worden besproken, bij de omgekeerde verhouding - een eerder doorgemaakte infectie.

De aanwezigheid van een of meer van de volgende symptomen duidt op een acute primaire infectie:

• anti-VCA IgG (vroeg gedetecteerd, en later neemt het gehalte af);
• hoge titer (meer dan 1:320) of 4-voudige toename van de anti-VCA IgG-titer tijdens het verloop van de ziekte;
• tijdelijke stijging van de anti-EA-D-titer (1:10 of meer);
• vroege anti-VCA IgG zonder anti-EBNA, en later het ontstaan van anti-EBNA.

Een acute of primaire infectie veroorzaakt door het Epstein-Barr-virus wordt uitgesloten als de titers van anti-VCA IgG en anti-EBNA in het bloedserum niet veranderen bij dynamische bestudering (tijdens de acute periode en tijdens het herstel).

De aanhoudende aanwezigheid van hoge titers van vroeg antigeen en anti-VCA IgG duidt op een chronische infectiefase.

Het aantonen van antilichamen tegen het Epstein-Barrvirus wordt gebruikt om de ziekte van Pfeiffer en chronische infecties veroorzaakt door het Epstein-Barrvirus te diagnosticeren.

Antilichamen tegen het Epstein-Barr-virus kunnen worden aangetoond bij de volgende ziekten: secundaire immuundeficiënties, zoals HIV-infectie, neuskeelholtekanker, Burkitt-lymfoom, CMV-infectie, syfilis, ziekte van Lyme, brucellose, etc.

[ 1 ], [ 2 ], [ 3 ], [ 4 ], [ 5 ]