PCR van hepatitis C

HCV in het materiaal is normaal gesproken afwezig.

In tegenstelling tot serologische methoden voor de diagnose van virale hepatitis C, waarbij antilichamen tegen HCV worden gedetecteerd, kan PCR de aanwezigheid van HCV-RNA direct detecteren en de concentratie ervan in het testmateriaal kwantificeren. De test heeft een specifieke specificiteit en hoge gevoeligheid: tien HCV-RNA-moleculen in het testmateriaal zijn voldoende voor detectie. Detectie van antilichamen tegen HCV bevestigt alleen het feit van infectie van de patiënt, maar laat niet toe om de activiteit van het infectieuze proces (over de replicatie van het virus) en de prognose van de ziekte te beoordelen. Daarnaast antilichamen tegen HCV gedetecteerd in het bloed van patiënten met acute en chronische hepatitis, evenals bij patiënten die ziek zijn en hersteld, maar vaak antistoffen verschijnen in het bloed slechts een paar maanden na het begin van de klinische ziekte, waardoor het moeilijk te diagnosticeren. De detectie van HCV in het bloed met behulp van PCR is een meer informatieve diagnostische methode. De detectie van HCV-RNA bij PCR getuigt van viremie, maakt het mogelijk de replicatie van het virus in het lichaam te beoordelen en dient als een van de criteria voor de effectiviteit van antivirale therapie. Detectie van HCV-RNA door PCR in de vroege stadia van de ontwikkeling van een virale infectie tegen de achtergrond van de volledige afwezigheid van serologische markers kan dienen als het vroegste bewijs van infectie. De geïsoleerde detectie van HCV-RNA tegen de achtergrond van de volledige afwezigheid van enige andere serologische markers kan het vals-positieve resultaat van PCR echter niet volledig elimineren. In dergelijke gevallen is een uitgebreide evaluatie van klinische, biochemische en morfologische onderzoeken nodig, met herhaalde herhaalde bevestiging van de aanwezigheid van PCR-infectie.

Van groot belang is het gebruik van de PCR-methode bij patiënten met chronische virale hepatitis C, omdat in de meeste van hen er geen correlatie is tussen de aanwezigheid van virale replicatie en de activiteit van leverenzymen. In dergelijke gevallen maakt alleen PCR het mogelijk om de aanwezigheid van virale replicatie te beoordelen, vooral als het eindresultaat kwantitatief wordt uitgedrukt. In de meeste gevallen komt het verdwijnen van HCV-RNA uit bloedserum later dan de normalisatie van leverenzymen, dus hun normalisatie kan niet dienen als basis voor het stoppen van antivirale behandeling.

Het is praktisch belangrijk voor de detectie van HCV-RNA om met behulp van PCR-methode niet alleen serum, maar ook lymfocyten, hepatobiobaptam te onderzoeken. Virussen kunnen 2-3 keer vaker in het leverweefsel worden gedetecteerd dan in serum. Bij het evalueren van de resultaten van de studie van bloedserum voor HCV-RNA, moet eraan worden herinnerd dat viremie fluctuerend van aard kan zijn (zoals de verandering in enzymactiviteit). Daarom kan na positieve resultaten van de PCR-studie een negatief resultaat worden verkregen en omgekeerd. In dergelijke gevallen is het beter om hepatobiobaths te onderzoeken om de twijfels op te lossen die zich voordoen.

Detectie van HCV-RNA in een materiaal met behulp van PCR wordt gebruikt voor de volgende doeleinden:

• resolutie van twijfelachtige resultaten van serologische onderzoeken;
• differentiatie van virale hepatitis C van andere vormen van hepatitis;
• de detectie van de acute fase van de ziekte in vergelijking met de overgedragen infectie of contact; het stadium van infectie van pasgeborenen van seropositieve HCV-moeders;
• monitoring van de effectiviteit van antivirale behandeling.

Patiënten met verdenking op virale hepatitis C:

• donoren;
• personen met risicofactoren;
• personen met verhoogde activiteit van ALT;
• patiënten met acute hepatitis

Alle bovenstaande kenmerken van evaluatie van resultaten en benaderingen voor de diagnose van HCV met PCR zijn ook van toepassing op andere infecties.

De PCR-methode maakt het niet alleen mogelijk om HCV-RNA in het testmateriaal te detecteren, maar ook om het genotype vast te stellen. Bepaling van het genotype van het virus is van groot belang voor de selectie van patiënten met chronische virale hepatitis C om een behandeling met interferon-alfa en ribavirine uit te voeren. Laboratorium indicaties voor de behandeling van chronische virale hepatitis C met interferon-alfa zijn als volgt:

• verhoogde transaminase-activiteit;
• aanwezigheid van HCV-RNA in het bloed;
• genotype 1 HCV;
• hoge viremie in het bloed (meer dan 8 × 10 ⁵ kopieën / ml).

Momenteel kan het HCV-RNA-gehalte in bloedserum worden gekwantificeerd met behulp van PCR, wat van groot belang is voor de controle van interferon-alfabehandeling. Viremie niveaus geëvalueerd als volgt: het gehalte van HCV RNA 10 ² om 10 ⁴ kopieën / ml - zwak; 10 ⁵ om 10 ⁷ kopieën / ml - gemiddeld hoger dan 10 ⁸ kopieën / ml - hoog. Met effectieve behandeling neemt het niveau van viremie af.

[1], [2], [3], [4]