Hepatitis C PCR

Normaal gesproken is HCV niet aanwezig in het materiaal.

In tegenstelling tot serologische methoden voor de diagnose van virale hepatitis C, die antilichamen tegen HCV detecteren, maakt PCR het mogelijk om de aanwezigheid van HCV-RNA direct te detecteren en de concentratie ervan in het testmateriaal te kwantificeren. De test is soortspecifiek en heeft een hoge gevoeligheid: tien HCV-RNA-moleculen in het testmateriaal zijn voldoende om het te detecteren. Detectie van antilichamen tegen HCV bevestigt alleen het feit van een infectie bij de patiënt, maar maakt het niet mogelijk om de activiteit van het infectieproces (replicatie van het virus) en de prognose van de ziekte te beoordelen. Bovendien worden antilichamen tegen HCV gedetecteerd in het bloed van patiënten met acute en chronische hepatitis, en bij patiënten die ziek en hersteld zijn geweest. Vaak verschijnen antilichamen in het bloed pas enkele maanden na het begin van het klinische beeld van de ziekte, wat de diagnose compliceert. Detectie van HCV in het bloed met behulp van PCR is een meer informatieve diagnostische methode. Detectie van HCV-RNA in PCR duidt op viremie, maakt het mogelijk om de replicatie van het virus in het lichaam te beoordelen en dient als een van de criteria voor de effectiviteit van antivirale therapie. Detectie van HCV-RNA door PCR in de vroege stadia van een virale infectie, bij volledige afwezigheid van serologische markers, kan dienen als het vroegste bewijs van infectie. Geïsoleerde detectie van HCV-RNA bij volledige afwezigheid van andere serologische markers kan een vals-positieve PCR-uitslag echter niet volledig uitsluiten. In dergelijke gevallen is een uitgebreide beoordeling van klinische, biochemische en morfologische studies met herhaalde, meervoudige bevestiging van de aanwezigheid van infectie door PCR noodzakelijk.

Het gebruik van de PCR-methode bij patiënten met chronische virale hepatitis C is van groot belang, aangezien bij de meeste patiënten geen correlatie bestaat tussen de aanwezigheid van virale replicatie en de activiteit van leverenzymen. In dergelijke gevallen kan alleen PCR de aanwezigheid van virale replicatie beoordelen, vooral als het eindresultaat kwantitatief wordt weergegeven. In de meeste gevallen van de ziekte treedt het verdwijnen van HCV-RNA uit het bloedserum later op dan de normalisatie van de leverenzymen, waardoor hun normalisatie geen reden kan zijn om de antivirale behandeling te staken.

Het is praktisch gezien belangrijk om niet alleen bloedserum, maar ook lymfocyten en hepatobiopten te onderzoeken met behulp van de PCR-methode om HCV-RNA te detecteren. Virussen kunnen 2-3 keer vaker worden gedetecteerd in leverweefsel dan in bloedserum. Bij het evalueren van de resultaten van een bloedserumtest op HCV-RNA moet rekening worden gehouden met het feit dat viremie van nature fluctuerend kan zijn (evenals veranderingen in enzymactiviteit). Daarom kan na een positieve PCR-test een negatieve uitslag worden verkregen en vice versa. In dergelijke gevallen is het beter om hepatobiopten te onderzoeken om eventuele twijfels weg te nemen.

Detectie van HCV-RNA in materiaal met behulp van PCR wordt gebruikt voor de volgende doeleinden:

• oplossen van twijfelachtige serologische testresultaten;
• onderscheid tussen virale hepatitis C en andere vormen van hepatitis;
• identificatie van het acute stadium van de ziekte in vergelijking met de eerdere infectie of het eerdere contact; bepaling van het infectiestadium van pasgeborenen van HCV-seropositieve moeders;
• het toezicht op de effectiviteit van antivirale behandeling.

Patiënten met vermoedelijke virale hepatitis C:

• donoren;
• personen met risicofactoren;
• personen met verhoogde ALT-activiteit;
• patiënten met acute hepatitis

Alle hierboven genoemde kenmerken van de evaluatie van resultaten en benaderingen voor de diagnose van HCV met behulp van PCR zijn ook van toepassing op andere infecties.

De PCR-methode maakt het niet alleen mogelijk om HCV-RNA in het te onderzoeken materiaal te detecteren, maar ook om het genotype ervan vast te stellen. Bepaling van het virusgenotype is van groot belang voor de selectie van patiënten met chronische virale hepatitis C voor behandeling met interferon-alfa en ribavirine. Laboratoriumindicaties voor de behandeling van chronische virale hepatitis C met interferon-alfa zijn als volgt:

• verhoogde transaminase-activiteit;
• aanwezigheid van HCV-RNA in het bloed;
• HCV-genotype 1;
• hoge viremie in het bloed (meer dan 8×10 ⁵ kopieën/ml).

Momenteel is het mogelijk om het HCV-RNA-gehalte in bloedserum kwantitatief te bepalen met behulp van de PCR-methode, wat van groot belang is voor de monitoring van de behandeling met interferon-alfa. De mate van viremie wordt als volgt beoordeeld: bij een HCV-RNA-gehalte van 10,2 ^tot 10,4 ^kopieën /ml - zwak; bij ^10,5 tot ^10,7 kopieën/ml - gemiddeld, boven 10,8 ^kopieën /ml - hoog. Bij een effectieve behandeling neemt de mate van viremie af.

[ 1 ], [ 2 ], [ 3 ], [ 4 ]