Confocale microscopie

Confocale microscopie wordt nu beschouwd als een van de meest veelbelovende methoden voor huidimaging in vivo, en daarom is de interesse hierin zowel onder clinici als onder vertegenwoordigers van wetenschappelijke onderzoeksinstituten ongewoon hoog.

[1], [2], [3], [4]

Confocale microscopie mogelijkheden

In de dermatologie wordt confocale laser-microscopie gebruikt voor:

• de penetratie van verbindingen in de huid bestuderen (penetratieroutes, kinetica, verdeling in de huid);
• observatie van de klieren (definitie van actieve en passieve toestand);
• studies van het microcirculatiebed (inclusief in real time);
• diagnose van neoplasmata.

Zonder de verdiensten en tekortkomingen van de bovenstaande confocale microscopie-microscopie te bespreken, merken we dat fluorescente laser confocale microscopie de laatste jaren steeds populairder is geworden.

[5], [6], [7],

Confocale microscopie voor huidonderzoek

Confocale microscopie biedt twee onschatbare kansen - studie van de weefsels op cellulair niveau in een staat van fysiologische leven en demonstraties van onderzoeksresultaten (dat wil zeggen, de cellulaire activiteit ..) In vier dimensies - hoogte, breedte, diepte en tijd. Voor de beeldkwaliteit en de diepte van de studie wordt de belangrijkste rol gespeeld door het vermogen van het weefsel om licht door te geven, met andere woorden de transparantie ervan. De methode van confocale microscopie is non-contact, de lichtstraal veroorzaakt geen schade of ongemak voor de patiënt of het proefdier.

Om de huid te bestuderen, wordt gebruik gemaakt van confocale scanninglasermicroscopie (CSLM). Met deze methode kunt u de epidermis en papillaire dermislaag zien met een resolutie die dicht bij de histologische is. Alle onderzoeksresultaten worden op de monitor weergegeven en opgeslagen als een pakket afbeeldingsbestanden (in de vorm van een microfilm (in dynamiek) of microfoto's).

Er zijn twee soorten methoden:

• Reflecterend (reflectantie CSLM) - is gebaseerd op het feit dat verschillende intracellulaire en intercellulaire structuren een verschillende brekingsindex van licht hebben, wat het mogelijk maakt om een contrastbeeld te verkrijgen.
• fluorescentie (fluorescentie CSLM) - maakt gebruik van laserlicht dat de huid penetreert en exo- of endochromoforen opwekt, die in reactie beginnen met het uitzenden van fotonen (d.w.z. Fluorescentie).

Laterale resolutie is de minimale afstand tussen punten op het horizontale vlak, d.w.z. Een vlak evenwijdig aan het oppervlak van de huid. Axiale resolutie is de minimale afstand tussen punten op een vlak loodrecht op het oppervlak van de huid.

[8], [9], [10], [11], [12], [13], [14], [15]

De geschiedenis van confocale microscopie

Het idee om een microscoop te maken die op cellulair niveau in staat is om een intravitale snede van levend weefsel te laten zien, werd 130 jaar geleden actief ontwikkeld. Het belangrijkste element van moderne microscopen werd aan het einde van de 19e eeuw ontworpen en was een roterende schijf met de kleinste gaten die spiraalvormig zijn geplaatst. Deze schijf is uitgevonden in 1883 door een Duitse student Paul Nipkov, ter ere waarvan hij zijn naam ontving: de Nipkov-schijf (of nipkov-schijf). De uitvinding was gebaseerd op het vermogen van licht, dat door de kleinste gaten in de schijf en de vergrotende lens passeert, om in de diepte van het weefsel te dringen en het celfragment op een afstand van het oppervlak te verlichten. Als de schijf snel ronddraait, worden de fragmenten toegevoegd aan het totaalbeeld. Door de structuur van het object te verwijderen of te benaderen, kan de diepte van het optische gedeelte van het te onderzoeken weefsel worden gevarieerd.

Pas met de komst van VTR's in de jaren tachtig en computers die afbeeldingen kunnen verwerken, was er begin jaren negentig een reële kans om moderne microscopen te maken en effectief toe te passen die in onze tijd worden gebruikt.