Hepatitis B-virus

Hepatitis B is een infectieziekte van een persoon die wordt gekenmerkt door selectieve beschadiging van de lever door een virus. Deze vorm van hepatitis is de gevaarlijkste in zijn gevolgen onder alle bekende vormen van virale hepatitis. Het veroorzakende agens is het hepatitis B-virus (HBV).

Eerste antigeen van hepatitis B-virus is aangetroffen Blumberg B. 1964 in serum Australische inboorling, en de ziekteverwekker werd gevonden in 1970, D. Dane (et al.), En kreeg de naam van Dane deeltjes, omdat er geen zekerheid dat , dat dit echt een virus is, niet de componenten ervan. Vervolgens verdwenen alle twijfels, omdat in de Dane-deeltjes genomisch DNA en een van virale DNA afhankelijk DNA-polymerase werden gevonden. Het virion bevat drie belangrijke antigenen, waarvoor de volgende benamingen in 1974 werden geïntroduceerd:

• HBsAg is een oppervlakkig of oplosbaar of Australisch antigeen.
• HBcAg is een kernantigeen (co-antigeen).
• HBeAg - e-antigeen, is gelokaliseerd in de kern van het virion en, anders dan HBcAg, niet alleen aanwezig in het virion is, maar ook in het bloed circuleert in vrije vorm of als een complex met de anti-HBeAg. Het wordt uitgescheiden in het bloed van de hepatocyten met actieve replicatie van HBV.

Het oppervlakte-antigeen - HBsAg - bestaat in de vorm van drie morfologisch verschillende varianten: 1) vertegenwoordigt de supercapsid van het gehele virion; 2) komt in grote hoeveelheden voor in de vorm van deeltjes met een diameter van 20 nm, met een bolvorm; 3) in de vorm van filamenten met een lengte van 230 nm. Chemisch zijn ze identiek. De samenstelling een totaal antigeen HBsAg en twee paar elkaar uitsluitende typespecifieke determinanten: d / y en w / r, zodat er vier belangrijkste subtype HBsAg (en dus HBV): adw, adr, en ayw aur. Antigeen a verschaft de vorming van een gemeenschappelijke kruisimmuniteit voor alle subtypes van het virus.

Eigenlijk heeft het virion, het Dain-deeltje, een bolvorm en een diameter van 42 nm. De supercapsid van het virion bestaat uit drie eiwitten: het hoofd (hoofd), groot en medium. Het genoom is ingesloten in een capside en wordt voorgesteld door een dubbelstrengig ringvormig DNA met een massa van 1,6 MD. Het DNA bestaat uit ongeveer 3200 nucleotiden, maar de "plus" is 20-50% korter dan het minteken. Met het 5'-uiteinde van het lange filament is het virusspecifieke eiwit covalent gebonden. De 5'-uiteinden van beide strengen zijn complementair en vormen "kleverige" sequenties met een lengte van 300 nucleotiden, zodat de filamenten in de ring zijn gesloten. Het gehalte aan G + C in virion-DNA is 48-49 mol%. In de kern van het virion bevindt zich naast genomisch DNA-viraal DNA-afhankelijk DNA-polymerase. Het "minus" -define DNA van HBV bevat slechts vier genen (S, C, P en X), maar ze zijn zeer compact georganiseerd. De genen S, C, P, X overlappen elkaar sterk en regelen de synthese van de volgende producten. Gene S codeert voor de synthese van het hoofdmanteleiwit en bevat alle informatie over het oppervlakte-antigeen van HBsAg. Bovendien codeert het voor de synthese van middelgrote en grote envelopeiwitten. Eiwitten bevatten een gemeenschappelijk COOH-uiteinde, maar hun vertaling begint met drie verschillende initiatorcodons. Gen C codeert voor de synthese van capside-eiwitten (HBcAg en HBeAg); hoewel deze eiwitten gecodeerd zijn door een enkel gen, zijn de manieren van hun vertaling verschillend. Gene P is de grootste. Het bevat een deel van alle drie andere genen en codeert voor de enzymen die nodig zijn voor replicatie van het virus. In het bijzonder codeert het voor de reverse transcriptase, het domein van het enzym RNA-ase H, het 5'-terminale eiwit van de "minus" -keten. Gen X codeert voor eiwitten die de expressie (expressie) van alle virale genen regelen, in het bijzonder een eiwit met een massa van 17 kD, dat een transcriptie-transactivator is.

Eiwitten die een oppervlakte-antigeen vormen, bestaan in geglycosyleerde (gp) en niet-geglycosyleerde vorm. Glycosyleerd zijn gp27, gp33, gp36 en gp42 (de getallen worden aangegeven met m in kD). Supercapsid HBV bestaat uit het hoofd- of basische S-eiwit (92%); gemiddeld M-eiwit (4%) en groot of lang L-eiwit (1%).

• Het belangrijkste eiwit, p24 / gp27, of het belangrijkste eiwit (proteïne S), is het hoofdbestanddeel van de HBV-envelop. Bij afwezigheid van andere shell-eiwitten polymeriseert en vormt het bolvormige deeltjes met een diameter van 20 nm, die uit 100 polypeptidemoleculen bestaan.
• Een groot eiwit, p39 / gp42, of een lang eiwit (L-eiwit), is aanwezig in alle drie vormen van HBsAg. Het speelt een belangrijke rol bij de morfogenese van virionen en bij het verlaten van de cel. L-eiwit de sequentie van het M-eiwit, dat wordt aangevuld met N-uiteinde sequenties van het 108 (ayw) of 119 (adw, adr, ayr) aminozuurresten gecodeerd NPE-Sl-S-gengebied.
• Het middelste eiwit - gp33 / gp36, of het eiwit M, is ook aanwezig in alle drie morfologische vormen van HBsAg. Het eiwit M bevat aan het N-uiteinde een gebied van 55 aminozuurresiduen die worden gecodeerd door het pre-52-gebied van het S-gen. Aangenomen wordt dat deze site een belangrijke rol speelt bij de herkenning van hepatitis B-virus door levercellen met een beperkt gastheerbereik (humane, chimpansee-aap). De eiwitsequenties gecodeerd door de S-gen npe-S-regio's hebben een hoge immunogeniciteit en hun determinanten bevinden zich op het oppervlak van het virion. Daarom spelen antilichamen tegen deze antigenen een belangrijke rol bij de vorming van immuniteit tegen hepatitis B.

Synthese van virale eiwitten wordt strak gecontroleerd op het niveau van transcriptie en translatie. In de transcriptie van het virale genoom worden twee soorten mRNA gesynthetiseerd:

• een kleinere - 2100 nucleotiden - codeert voor de hoofd- en middeneiwitten van het membraan;
• groot - 3500 nucleotiden, d.w.z. Langer dan genomisch DNA zelf; het bevat terminale herhalingen van 100 nucleotiden lang.

Dit soort mRNA codeert voor het capside-eiwit en de producten van het P-gen en is ook een matrijs voor virale DNA-replicatie. Als onderdeel van het genoom zijn er versterkers (transcriptieversterkers) - regulerende elementen die de expressie van alle virale genen activeren en voornamelijk in de levercellen werken. In het bijzonder wordt gen S op een zeer hoog niveau alleen in de levercellen en onder de invloed van steroïde hormonen tot expressie gebracht. Deze omstandigheid verklaart waarom chronische hepatitis B en leverkanker (hepatoom) vaker worden waargenomen bij mannen dan bij vrouwen met een lager niveau van steroïdhormonen.

Andere regulerende elementen van het hepatitis B-virus moduleren (controle) de niveaus van synthese van individuele eiwitten. Een groot eiwit wordt bijvoorbeeld slechts in kleine hoeveelheden gesynthetiseerd. Het meeste op het oppervlak van infectieuze virionen. En het belangrijkste eiwit en, in mindere mate, het middelste eiwit worden in enorme hoeveelheden gesynthetiseerd en laten de cellen achter in de oppervlakte-antigeendeeltjes, die in het serum vele malen meer bevatten dan de rijpe virionen. Het aantal oppervlakte-antigeendeeltjes kan 1011-1013 zijn per 1 ml bloed (enkele honderden μg).

Hepatitis B-virus wordt geïsoleerd in een nieuwe familie van virussen - Hepadnaviridae, genus Orthohepadnavirus. Vergelijkbare hepadnavirussen werden gevonden in verschillende dieren (aardseiwitten, marmotten, chipmunks, Pekingeenden).

Reproductie van hepadnavirussen vindt op een ongebruikelijke manier plaats. In het bijzonder vindt de replicatie van genomisch DNA plaats via de tussenverbinding - RNA, dat wil zeggen met het mechanisme van reverse transcriptie.

De levenscyclus van het hepatitis B-virus.

• Adsorptie op de cel.
• Penetratie in de cel via receptor-gemedieerde endocytose mechanisme (hofstippel -> begrensd vial -> lysosoom -> nucleocapside en uitgang van het virale genoom in de kern hepatocyt).
• Intracellulaire reproductie.

Tijdens de penetratie in de cel verlengt de korte ("plus") DNA-keten zich (voltooit). In de kern synthetiseert het cellulaire DNA-afhankelijke RNA-polymerase een RNA van 3500 nucleotiden (pregenen) en kleinere mRNA's voor de synthese van virale eiwitten. Vervolgens worden de pregene en de virale DNA-polymerase verpakt in een nieuw gesynthetiseerd capside, dat wordt overgebracht naar het cytoplasma. Hier vindt de reverse transcriptie van het pregenoom plaats. Het synthetiseert een nieuw "minus" -define DNA. Nadat de synthese van het min-DNA is voltooid, wordt het pregenomische RNA vernietigd. Het virion DNA-polymerase op de "minus" -keten synthetiseert een "plus" -keten. Viraal DNA, nu dubbelstrengs, kan een lange tijd in de cel voorkomen en terugkeren naar de kern voor de volgende replicatiecyclus. Als het nieuwe virusdeeltje geen verdere replicatie ondergaat, wordt het nucleocapside dat wordt gevormd en door het celmembraan gaat, bedekt met super-capside, dat uit de cel komt en de korte "plus" DNA-keten stopt daar onmiddellijk. Dat is de reden waarom de lengte van deze thread varieert. In de typische acute vorm van hepatitis B verschijnen serologisch de volgende serologische markers achtereenvolgens in het bloed: HBsAg, HBeAg en antilichamen (IgM, IgG): anti-HBcAg. Anti-HBeAg en anti-HBsAg.

De samenstelling van het hepatitis B virus oncogeen, maar vond dat doordringen in het cellulaire chromosoom (in de verschillende secties), kan het virale DNA worden geïnduceerd daarin verschillende genetische aanpassing - deletie, translocatie, versterking, die de ontwikkeling van leverkanker kan veroorzaken - een van de ernstigste gevolgen van virale hepatitis B.

[1], [2], [3], [4], [5], [6], [7], [8],

Resistentie van het hepatitis B-virus

Het hepatitis B-virus is zeer resistent. Bij kamertemperatuur blijft het nog 3 maanden houdbaar, in de bevroren staat - gedurende meerdere jaren. Het virus wordt volledig geïnactiveerd in de autoclaaf (120 ° C) onder terugvloeiing gedurende 30 minuten met droge warmte bij een temperatuur van 180 "C gedurende 60 min, bij 60 ° C -. Tot 10 uur bestand in zuur milieu, maar wordt vernietigd in een alkalisch. Het virus sterft wanneer het wordt behandeld met H202, chloramine, formaline, fenol en met UV-straling.

Pathogenese en symptomen van hepatitis B

Het virus wordt hematogeen rechtstreeks in de lever geïnjecteerd. Bij de pathogenese van hepatitis spelen auto-immuun humorale en cellulaire responsen een belangrijke rol. Aangenomen wordt dat de hepatocyten verliezen niet zozeer de directe werking van het virus zelf, maar met de gastheer immunologische reacties die plaatsvinden met de modificatie van het celmembraan van virale eiwitten die het verschijnen van autoantilichamen voor levercellen te induceren. Daarom kan het ontwikkelen van chronische hepatitis en cirrose van de lever worden beschouwd als een auto-immuunziekte.

Cellulaire auto-immuunreacties op virale eiwitten in het hepatocytenmembraan worden gemedieerd door T-cytotoxische lymfocyten en andere hepatische killer-cellen. Daarom kan acute dystrofie van de lever worden beschouwd als een reactie van afwijzing van een eigenaardige heterograft.

De incubatieperiode duurt van 45 tot 180 dagen, een gemiddelde van 60 tot 90 dagen. Het klinische beloop van hepatitis B wordt gekenmerkt door grote diversiteit; de ziekte kan optreden: in een latente vorm, alleen gedetecteerd door laboratoriummethoden, in een typische icterische vorm en in een kwaadaardige vorm die dodelijk eindigt. De duur van de pre-geelzuchtige fase varieert van één dag tot enkele weken. De icterische periode is in de regel lang en wordt gekenmerkt door duidelijk gemarkeerde symptomen (geelzucht, hyperbilirubinemie, donker worden van de urine, icterische sclera). Langdurige vorm wordt waargenomen bij 15-20% van de patiënten en 90% van hen ontwikkelen chronische hepatitis B. Patiënten met chronische vorm frequent voorkomende auto-immune processen gepaard met een hoog gehalte aan protivopechenochnyh antilichamen die worden gedetecteerd door enzym-gekoppelde immunosorbent assay (IPM). Bij kinderen is hepatitis B mild en vaak zonder geelzucht, bij jonge kinderen - meestal asymptomatisch.

Postinfectieuze immuniteit (humoraal en cellulair) is lang, levenslang, vanwege virusneutraliserende antilichamen (anti-HBsAg) bij afwezigheid van oppervlakte-antigeen in het bloed. Vaak waargenomen latente immunisatie door herhaald contact met HBV, wat de oorzaak is van wijdverspreide immuniteit tegen het virus onder de bevolking. Gewoonlijk herstellen patiënten met een acute vorm van hepatitis B zich volledig als de antistoffen zich erop verzamelen. In sommige gevallen, ondanks het hoge niveau van het virale antigeen in het bloed (een omstandigheid die verklaart waarom parenterale infectie het vaakst voorkomt), worden er echter geen antilichamen tegen gevormd. Het virus blijft in de lever en een persoon voor een lange tijd, soms voor het leven, wordt een chronische drager. Deze omstandigheid is duidelijk verbonden met een zwakke immuunrespons. Een van de meest voorkomende resultaten van chronische hepatitis B is cirrose en leverkanker, die zich ontwikkelt na een latente periode van maximaal 30-50 jaar.

Epidemiologie van hepatitis B

De bron van infectie met het hepatitis B-virus is slechts een persoon. In tegenstelling tot eerdere voorstellingen die infectie met hepatitis B vindt uitsluitend plaats via de parenterale route wordt nu bewezen dat het in verscheidene secreties en excreties :. Speeksel, nasofaryngeale secreties, feces, traanvocht, zaad, menstruatiebloed, etc. Dus, infectie treedt niet alleen via de parenterale weg, maar ook seksuele en verticale (van moeder naar foetus), t. E. Vrijwel infectie met hepatitis B-virus kan op vele manieren.

Hepatitis B in de wereld heeft zoveel mensen gedood als tijdens alle jaren van de Tweede Wereldoorlog. Het aantal dragers van HBV, volgens de WHO, is van 0,1 tot 20% van de bevolking van verschillende landen of regio's.

[9], [10], [11], [12], [13], [14], [15], [16],

Diagnose van hepatitis B

Momenteel is de belangrijkste methode voor de diagnose van hepatitis B het gebruik van een omgekeerde passieve hemagglutinatiereactie (ROSGA) om een virus of het oppervlakteantigeen daarvan, HBsAg, te detecteren. Zoals reeds opgemerkt, bevat het bloed van het oppervlakte-antigeen vele malen meer dan het virus zelf (100-1000 maal). Voor de reactie van ROPGA worden erytrocyten gesensibiliseerd met antilichamen tegen het hepatitis B-virus. Als er een antigeen in het bloed zit, vindt er een hemagglutinatiereactie plaats. ROPGA is eenvoudig, handig, heel specifiek. Om antilichamen tegen het HBsAg-virusantigeen te detecteren, worden verschillende immunologische werkwijzen (DSC, RPGA, IFM, RIM, etc.) gebruikt. Bovendien worden PCR-varianten gebruikt om HBV en zijn antigenen te detecteren.

Verschillende immunologische werkwijzen kunnen worden gebruikt voor het detecteren van antilichamen tegen het virale antigeen (HBsAg) in het serum van de patiënt (DSC, RPGA, precipitatiereactie, IFM, RIM, etc.).

[17], [18], [19], [20], [21], [22],

Specifieke preventie van hepatitis B

Rekening houdend met de hoge incidentie van hepatitis B en met het feit dat er veel HBV-dragers zijn in de wereld, zijn WHO-vaccinaties tegen hepatitis B verplicht en moeten ze in het eerste levensjaar worden uitgevoerd. Voor vaccinatie worden twee soorten vaccins gesuggereerd. Om een van hen te bereiden, wordt het plasma van virusdragers als een grondstof gebruikt, omdat het virusantigeen daarin aanwezig is in hoeveelheden die voldoende zijn voor de bereiding van het vaccin. De belangrijkste voorwaarde voor de bereiding van dit type vaccin is hun volledige veiligheid, d.w.z. Volledige inactivering van het virus, dat wordt verschaft door technologie voor vaccinbereiding. Om een vaccin van een ander type te vervaardigen, worden genetische manipulatiemethoden gebruikt, in het bijzonder wordt een recombinante kloon van gist die het oppervlakteantigeen van het hepatitis B-virus produceert gebruikt om het antigene materiaal te bereiden.

Beide vaccins zijn zeer effectief (bescherm 95% van de gevaccineerde). De duur van postvaccinale immuniteit is niet minder dan 5-6 jaar. Vaccins zijn gemaakt voor zowel volwassenen als baby's en jonge kinderen - het belangrijkste onderdeel in de wereldwijde strijd tegen hepatitis B. De volledige vaccinatiecyclus bestaat uit drie injecties:

Ik doseer - onmiddellijk na de geboorte; II dosis - na 1-2 maanden; III dosis - tot het einde van het eerste levensjaar.

Deze vaccins opgenomen in het uitgebreide programma van de immunisatie, de WHO en afgestemd op de kalender van de uitvoering (volgens de WHO-aanbevelingen over het 1e jaar van het leven wordt uitgevoerd vaccinatie tegen tuberculose, polio, hepatitis B, mazelen, tetanus, difterie, kinkhoest).

Gammaglobuline, dat antilichamen tegen HBV bevat, wordt gebruikt voor nood-passieve immunoprofylaxe aan personen die contact hebben gehad met een hepatitis-B-patiënt.

Om hepatitis B (acute en chronische vormen) te behandelen, gebruikt u interferon en amixine (voor de inductie van de endogene synthese ervan). Bij de behandeling van chronische hepatitis B is een nieuw medicijn lamivudine (synthetische nucleoside) effectief.