Immunohistochemische markers bij de diagnose van precancereuze laesies van het mondslijmvlies en rode rand van de lippen

Een tijdige en effectieve diagnose van neoplastische laesies van de orale mucosa (CRS) en rode liprand (CCG) blijft een ernstig probleem van oncostomatologie. Plaveiselcelcarcinoom van de mondholte bezet de zesde plaats in de wereld in frequentie onder kwaadaardige tumoren van alle lokalisaties. In de Russische Federatie is de incidentie van maligne neoplasmata van de mondholte 2-4% van het totale aantal kwaadaardige tumoren van de mens.

In de afgelopen jaren heeft de structuur van ziekten van het mondslijmvlies aanzienlijke veranderingen ondergaan, in het bijzonder een toename in het aandeel van voorstadia van kanker. In dit opzicht blijft de effectieve niet-invasieve detectie van maligniteiten een urgente taak van de tandheelkunde.

Ondanks de schijnbare eenvoud van klinische beeldvorming voorspeller van veranderingen van het mondslijmvlies en CGC met betrekking tot externe lokalisatie, bepaling nosologische prekanker, enkel op basis van de indruk door onderzoek en palpatie, vaak tot diagnostische fouten zijn wisselend keratinisatie of ulceratie zelfs markornyh elementen de nederlaag maakt het moeilijk om te differentiëren. Bijzonder moeilijk vroege diagnose van maligniteit, aangezien de klinische symptomen verschijnen een beetje later daadwerkelijk heeft plaatsgevonden kwaadaardige transformatie.

Het onderzoek van V.P. Kharchenko et al. Het is aangetoond dat meer dan 2/3 van de patiënten ten tijde van de behandeling in de medische instelling en het vaststellen van de diagnose III-IV stadia van de ziekte hebben. Een van de redenen voor late behandeling is de "vervaging" van het ziektebeeld in de beginfase van de ziekte. Bovendien is de noodzaak aangetoond om organisatorisch en methodologisch werk te verrichten en het kennisniveau van tandartsen over de vroege klinische manifestaties van precancereuze ziekten van het mondslijmvlies te vergroten. Uit de uitgevoerde tests bleek dat slechts 42,8% van de tandartsen de vroege manifestaties van mondkanker onderscheidt, 4,2% van de respondenten kan de primaire diagnostische maatregelen voor de opsporing van kanker van deze lokalisatie correct uitvoeren.

Het percentage ongeneeslijke vormen van kanker van het mondslijmvlies als gevolg van diagnostische fouten, volgens verschillende auteurs, bereikt 58,4-70%. De situatie wordt gecompliceerd door de onopgeloste problemen van klinische diagnose van prekanker, in het bijzonder de moeilijkheid om het begin van maligniteit te differentiëren, evenals het probleem van het kiezen van een werkwijze voor het behandelen van een pre-tumorziekte. Er zijn geen absolute en relatieve indicaties voor biopsie, vooral in de stadia van conservatieve behandeling. Tot op heden is er geen enkel voorbeeld in de literatuur van het diagnostische criterium van het klinische niveau waarnaar een tandarts zou kunnen verwijzen bij het kiezen van een geschikte methode voor het behandelen van een bepaalde pre-tumorziekte.

Oplossing van diagnostische problemen die de meeste auteurs zien in hulpdiagnostiek (cytologie, cheilostomatoscopie, biomicroscopie, optische coherentietomografie). Deze methoden zijn echter nogal subjectief, omdat ze alleen de beschrijvende aard van kwalitatieve veranderingen in de aangetaste weefsels dragen. Een manier om morfologische veranderingen te kwantificeren is het bepalen van immunohistochemische markers.

De introductie in de moderne praktijk van moderne morfologische methoden voor tumorverificatie heeft de kwaliteit van de diagnose en behandeling van kwaadaardige tumoren aanzienlijk verbeterd. Methodologische mogelijkheden van de moderne moleculaire oncologie verbreed momenteel met behulp van immunohistochemische studies kan niet alleen bepalend voor de histologische diagnose van de tumor, maar ook om het morphofunctional kenmerken in termen van agressiviteit en prognose in relatie tot precancereuze letsels en kanker is al ontwikkeld.

Volgens moderne ideeën is de basis van kwaadaardige transformatie van cellen de activering van enkele of meervoudige cellulaire oncogenen of suppressorgenen. Het wordt waargenomen bij 30% van de kankergevallen bij de mens en kan in veel gevallen immunohistochemisch worden gedetecteerd. Oncogenen ras p21, HER2 / neu, bcl-2 en suppressorgenen p53 en Rb in verschillende tumoren zijn bestudeerd. Sommige van de vermelde oncogenen (en suppressorgenen) zijn onafhankelijke prognostische en voorspellende symptomen.

Het epitheel van het mondslijmvlies is de locus praedifectionis van de vorming van kankerachtige tumoren. Externe factoren (traumatische occlusie sites, de scherpe randen van restauraties insolvente orthopedische ontwerp, irrationele individuele mondhygiëne, inflammatoire en destructieve parodontale laesies) kan samen met genetische (erfelijke) factoren een rol spelen bij het veroorzaken van kanker van de lokalisatie. Bij de ontwikkeling van plaveiselcelcarcinoom van het mondslijmvlies letsel kan worden betrokken bij de mechanismen van controle processen epitheelhyperplasie en squameuze metaplasie zijn.

Morfologische eigenschappen van oraal slijmvlies epitheel tijdens maligniteit geassocieerd met een verandering in een set van differentiatie (fenotype cytokeratine voornamelijk epitheellaag) markers CEA expressie en proliferatie merker Ki - 67.

P53 is een tumorsuppressorgen, waarvan het eiwitproduct een nucleaire transcriptiefactor is met vele functies, waaronder het blokkeren van de passage van cellen door de celcyclus en inductie van apoptose. Het p53-eiwit wordt tot expressie gebracht in alle cellen van het lichaam. In afwezigheid van schade aan het genetisch apparaat bevindt het p53-eiwit zich in een inactieve toestand en wanneer DNA-schade optreedt, wordt het DNA geactiveerd. Activering bestaat uit het verkrijgen van het vermogen om te binden aan DNA en transcriptie van genen te activeren die een nucleotidesequentie in het regulerende gebied bevatten, hetgeen wordt aangegeven door het p53-responselement. Mutatie van p53 in cellen optreedt ongeveer 50% van kanker leidt tot eiwitsynthese met het verlies van zijn functies, maar een hoge stabiliteit en ophopen in de kern die immunohistochemisch uitgedrukt in een duidelijke kleuring van kernen.

Het "wilde" type van het wt-53-oncosuppressor-gen en het p53-eiwit dat daardoor wordt gecodeerd, spelen een centrale rol bij de ontwikkeling van apoptose. Wanneer DNA wordt beschadigd, treedt expressie van het wt53-gen en het overeenkomstige eiwit op. De laatste blokkeert de celcyclus in de G1-S-fase en remt daardoor verdere replicatie van het beschadigde DNA, dat wordt gesynthetiseerd in de S-fase, en creëert omstandigheden voor het verwijderen van de beschadigde plaats en reparatie van de veranderde plaats ervan. Als er herstel plaatsvindt, blijft de cel delen en genereert deze gezonde cellen. Als reparatie echter niet plaatsvindt, zijn er andere mechanismen inbegrepen die zorgen voor de vernietiging van een dergelijke cel met beschadigd (mutageen) DNA, d.w.z. Het genetisch programma van celdood is aan het ontwikkelen - apoptose.
In de afgelopen jaren is gesuggereerd dat de p53-status een beslissende factor kan zijn die de gevoeligheid van een tumor voor chemo- en radiotherapie bepaalt. Bevestiging van deze aanname zijn talrijke studies die aantonen dat gemuteerde p53 een factor is van slechte prognose en ineffectiviteit van adjuvante therapie voor een aantal verschillende neoplasma's van de orale mucosa.

Markers van proliferatie zijn ook een zeer informatieve diagnostische waarde bij het voorspellen van het beloop van kwaadaardige tumoren. Proliferatieve activiteit is een leidende factor, zowel in het mechanisme van kwaadaardige transformatie van cellen, als in het biologische gedrag van reeds opduikende tumoren. Een veelbelovende marker van proliferatieve activiteit is het Ki-67-antigeen, dat praktisch in alle fasen van de celcyclus tot expressie wordt gebracht en dienovereenkomstig de grootte van de proliferatieve pool weerspiegelt. Het gen dat codeert voor Ki-67 bevindt zich op de lange arm van het 10-chromosoom. Ki-67 verwijst naar regulerende eiwitten. Het uiterlijk valt samen met het binnengaan van de cel in mitose, wat het mogelijk maakt om het te gebruiken als een universele marker van proliferatie bij het evalueren van de groei van kwaadaardige tumoren.

Er zijn een aantal studies uitgevoerd die de diagnostische waarde van immunohistochemische markers bestuderen bij het voorspellen van het beloop van precancereuze laesies van de orale mucosa en de rode rand van de lippen. Murti PR et al. Bestudeerde de expressie van p53 met rode SSRI met een vast percentage. Toen de immunohistochemische methode werd bepaald, kon expressie van p53 de kwaadaardige status van de prekanker van de orale mucosa niet onthullen. De auteurs suggereerden dat de piek van overexpressie van p53 dicht bij de tijd van transformatie van de prekanker in kanker ligt en niet kan worden gebruikt als vroege marker voor het voorspellen van de maligniteit van de prekanker van de orale mucosa. Andere onderzoekers vonden dat het menselijke gen TP53 codeert voor ten minste 9 verschillende isovormen. Een ander lid van de p53-familie, p63, omvat 6 verschillende isovormen en speelt een sleutelrol bij de ontwikkeling van de orale mucosa, speekselklieren, tanden en huid. Er werd gesuggereerd dat p63 geassocieerd is met de ontwikkeling van plaveiselcelcarcinoom van het hoofd en de nek. Er werden echter geen statistisch significante veranderingen in de expressie van nieuwe isovormen van p53 en p63 in de voorstadium van SSRI waargenomen in vergelijking met niet-gemodificeerd weefsel. Studies door De Sousa FA bevestigden de prognostische significantie van de p53-marker bij het bepalen van het potentieel van maligne transformatie van de prekanker van de orale mucosa. Tegelijkertijd zijn sommige auteurs van mening dat p53 niet kan worden gebruikt als een enkele marker voor het voorspellen van de ontwikkeling van kanker.

Even veelbelovende prognostische immunohistochemische detectievlak wordt weergegeven in de onderzochte weefselmonsters podoplanina - integrale membraaneiwitten mucoprotein uitgedrukt als het ongewijzigde en gewijzigde ontstekings- en neoplastische endothelium van lymfatische haarvaten. Onderzoekers hadden een statistisch significant verband expressie podoplanina iABCG2 gevonden (ATP-bindingseiwit subgroep G2) met de maligne transformatie van lichen planus (het risico significant hoger bij co-expressie podoplanina en ABCG2, dan zonder co-expressie podoplanina en ABCG2) en concludeerde dat podoplanin en ABCG2 kan worden gebruikt als biomarkers om het risico van maligne transformatie met precancereuze letsels RBCU

Onderzoeken van buitenlandse wetenschappers bevestigden de diagnostische betekenis van Fas / FasL-expressie als biomarkers voor de ontwikkeling van kanker. Fas is een type I transmembraan glycoproteïne (synoniemen APO-I, CD95) en induceert apoptose in cellen na interactie met Fas-ligand (FasL) of agonistisch monoklonaal antilichaam tegen Fas.

Tegelijkertijd is bekend dat Fas tot expressie komt in vrijwel alle soorten weefsels. Verhoogde Fas-expressie wordt waargenomen in de nieren, de lever, het hart en de thymus. Bovendien wordt deze receptor tot expressie gebracht op veel tumoren, evenals op met virus geïnfecteerde cellen. De reden voor de resistentie van verschillende celtypen aan Fas-afhankelijke apoptose kan verhoogde productie van oplosbaar Fas door deze cellen zijn. Oplosbaar Fas is een product van alternatieve splicing en is in staat om apoptose geïnduceerd door agonistische monoklonale antilichamen tegen Fas of FasL te remmen.

Aldus dubbelzinnige interpretatie van de resultaten van onderzoek door verschillende auteurs gedragen kan worden geconcludeerd dat de huidige stand van moleculaire oncologie prospectief gebruiken immunohistochemische markering in combinatie met andere methoden voor diagnose en prognose van premaligne laesies van de orale mucosa.

Van bijzonder belang is het probleem van het rangschikken van immunohistochemische markers voor diagnostische significantie. Wij geloven dat ze, in volgorde van afnemend belang, in de volgende volgorde kunnen worden gerangschikt:

1. Immunohistochemische markers met een hoge diagnostische significantie: subplanin, ABCG2, bcl-2;
2. Immunohistochemische markers met een gemiddelde mate van diagnostische significantie: Bax, MMP-9;
3. Veelbelovende immunohistochemische markers, waarvan de diagnostische betekenis nader onderzoek vereist: MMP-2, MT1-MMP, Fas / FasL;
4. Immunohistochemische markers, waarvan de diagnostische betekenis het beloop van precancereuze ziekten voorspelt, worden niet bewezen: p53, p63.

Op basis van deze analyse van literatuurgegevens kan worden geconcludeerd dat de bepaling van immunohistochemische markers niet moet worden gezien als de enige methode voor het voorspellen van het verloop van precancereuze laesies van de orale mucosa en het identificeren van het risico van maligne transformatie, maar niettemin de werkwijze een grote diagnostische waarde in combinatie met andere methoden om het verloop van precancereuze ziekten te voorspellen.

Senior onderzoeker Kuznetsova Roza Gilevna. Immunohistochemische markers bij de diagnose van precancereuze laesies van het slijmvlies van de mond en de rode rand van de lippen // Praktische geneeskunde. 8 (64) december 2012 / deel 1

[1], [2], [3], [4], [5]