Medisch expert van het artikel
Nieuwe publicaties
Sauzern-blotting
Laatst beoordeeld: 23.04.2024
Alle iLive-inhoud wordt medisch beoordeeld of gecontroleerd op feiten om zo veel mogelijk feitelijke nauwkeurigheid te waarborgen.
We hebben strikte richtlijnen voor sourcing en koppelen alleen aan gerenommeerde mediasites, academische onderzoeksinstellingen en, waar mogelijk, medisch getoetste onderzoeken. Merk op dat de nummers tussen haakjes ([1], [2], etc.) klikbare links naar deze studies zijn.
Als u van mening bent dat onze inhoud onjuist, verouderd of anderszins twijfelachtig is, selecteert u deze en drukt u op Ctrl + Enter.
Southern blotting (ontwikkeld door E. Southern en R. Davies in 1975) is de belangrijkste methode waarmee genen van een bepaalde ziekte worden geïdentificeerd. Hiervoor wordt DNA van de cellen van de patiënt geëxtraheerd en verwerkt met één van de restrictie-endonucleasen (of meerdere). De resulterende fragmenten worden onderworpen aan elektroforese, waardoor ze in grootte kunnen worden gedimensioneerd (kleinere fragmenten bewegen sneller door de poriën van de gel). Vervolgens worden de fragmenten overgebracht (herdrukt) naar een nitrocellulosefilter, waarop de radioactief gemerkte probe gelaagd is. De probe bindt alleen aan de complementaire sequentie. Vervolgens wordt met de methode van autoradiografie de positie van het gewenste fragment van genomisch DNA op het elektroforegram bepaald.
Hybridisatie met de gelabelde DNA-probe RNA of DNA preparaten druppel toegebracht aan de vaste matrix zonder voorafgaande restrictie en elektroforese dot en slot hybridisatie genoemd, afhankelijk van de configuratie van de DNA vlekken op het filter (ronde of langgerekte, respectievelijk).
[