Medisch expert van het artikel
Nieuwe publicaties
Analyse voor gevoeligheid voor antibiotica: voorbereiding, decodering, hoeveel wordt gedaan
Laatst beoordeeld: 23.04.2024
Alle iLive-inhoud wordt medisch beoordeeld of gecontroleerd op feiten om zo veel mogelijk feitelijke nauwkeurigheid te waarborgen.
We hebben strikte richtlijnen voor sourcing en koppelen alleen aan gerenommeerde mediasites, academische onderzoeksinstellingen en, waar mogelijk, medisch getoetste onderzoeken. Merk op dat de nummers tussen haakjes ([1], [2], etc.) klikbare links naar deze studies zijn.
Als u van mening bent dat onze inhoud onjuist, verouderd of anderszins twijfelachtig is, selecteert u deze en drukt u op Ctrl + Enter.
Tegenwoordig wordt de analyse van de gevoeligheid voor antibiotica steeds populairder. De microflora van de mens is behoorlijk divers, vertegenwoordigd door een groot aantal micro-organismen, in verschillende biotopen.
Farmaceutische bedrijven hebben een groot aantal antibacteriële middelen, antibiotica, ontwikkeld die het mogelijk maken een normale verhouding en het aantal microbiële populaties in stand te houden. Sinds het begin van het tijdperk van antibiotica zijn veel ziekten die eerder als fataal werden beschouwd, genezen. Maar micro-organismen hebben ook de neiging om te overleven en zich geleidelijk aan aan te passen aan de werking van antibacteriële geneesmiddelen. In de loop van de tijd werden veel van hen resistent tegen veel geneesmiddelen, geconsolideerd in het genotype en begonnen van generatie op generatie over te gaan. Nieuwe micro-organismen zijn dus al niet aanvankelijk gevoelig voor bepaalde geneesmiddelen en hun doel kan ineffectief zijn. Apothekers ontwikkelen steeds meer nieuwe producten door nieuwe actieve ingrediënten aan hen toe te voegen en de basisformule te veranderen. Maar geleidelijk ontwikkelen ze ook weerstand.
De reden voor de verhoogde resistentie van microflora voor veel geneesmiddelen, en zelfs hun analogen, ligt vaak in de onjuiste en ongecontroleerde toediening van antibiotica. Artsen schrijven antibiotica en hun combinaties voor voor verschillende bacteriële ziekten. Tegelijkertijd is er geen voorlopige beoordeling van hoe effectief ze zullen zijn, de optimale dosering wordt niet gekozen, wat erg belangrijk is, zowel voor de behandeling als voor het voorkomen van mechanismen voor de ontwikkeling van verdere resistentie. Velen schrijven ten onrechte antibacteriële therapie voor, zelfs bij virale ziekten, wat niet effectief is, omdat het antibioticum niet werkt tegen de virussen.
Therapie wordt vaak voorgeschreven zonder voorafgaande gevoeligheidstests, de selectie van het actieve middel en de vereiste dosering voor elke specifieke ziekte en biotoop worden niet uitgevoerd. Omdat antibiotica "in de blinde" worden voorgeschreven, zijn er vaak gevallen waarin ze geen activiteit vertonen ten opzichte van die micro-organismen die de ziekte veroorzaakten en waarvan het aantal zou moeten worden verminderd. In plaats daarvan tasten ze andere vertegenwoordigers van de microflora aan, wat resulteert in een dysbiose, wat ook een vrij gevaarlijke pathologie is en tot ernstige gevolgen kan leiden. Vooral gevaarlijk zijn gevallen waarin het antibioticum de normale microflora vernietigt, die is ontworpen om het lichaam te beschermen en zijn normale werking te behouden. Er zijn ook gevallen waarin te veel of te weinig dosering wordt voorgeschreven.
Patiënten zijn ook onverantwoordelijk voor de behandeling. Vaak wordt de behandeling stopgezet nadat de symptomen ophouden zich zorgen te maken. Tegelijkertijd geven veel mensen de voorkeur aan het voltooien van de volledige cursus tot het einde. Dit is een van de factoren die bijdragen aan de ontwikkeling van resistentie bij bacteriën. De volledige cursus is ontworpen voor volledig pathogene microflora. Als de cursus niet is voltooid, wordt deze niet volledig gedood. Die micro-organismen die overleven, mutaties ondergaan, ontwikkelen mechanismen die hen beschermen tegen deze remedie en geven deze door aan de volgende generaties. Het gevaar is dat resistentie niet alleen wordt ontwikkeld met betrekking tot dit specifieke medicijn, maar ook tot de gehele groep geneesmiddelen.
Daarom is voor vandaag een van de meest effectieve middelen voor rationele therapie en het voorkomen van resistentie de voorlopige bepaling van de gevoeligheid voor het middel dat wordt toegediend en de selectie van de optimale dosering.
Indicaties voor de procedure testen op gevoeligheid voor antibiotica
Normaal gesproken moet een dergelijke analyse worden uitgevoerd in alle gevallen waarin antibacteriële therapie vereist is. Uitgaande van de basiswetten van antibioticatherapie, kan elk antibioticum alleen worden voorgeschreven nadat een voorlopige beoordeling van de gevoeligheid van de microflora voor dit middel is gemaakt, in het laboratorium is de optimale concentratie van de werkzame stof bepaald. In de praktijk wordt, vanwege verschillende redenen en omstandigheden, een dergelijk onderzoek vóór het begin van de behandeling niet uitgevoerd en wordt de arts gedwongen om een willekeurig geneesmiddel te selecteren.
Tegenwoordig worden gevoeligheidstests alleen uitgevoerd in die gevallen waarin de arts grote twijfels heeft over de vraag of de beoogde remedie effectief zal zijn, in gevallen van langdurige afwezigheid van het effect van het medicijn, evenals bij herhaald gebruik van hetzelfde middel in een beperkte tijdsperiode. Vaak wordt de gevoeligheid bepaald bij de behandeling van seksueel overdraagbare aandoeningen. Veel specialisten wenden zich tot analyse in het geval van bijwerkingen, allergische reacties en wanneer het nodig is om het ene geneesmiddel door het andere te vervangen.
Ze worden ook vaak genoemd voor de selectie van geneesmiddelen voor antibiotische therapie tijdens de herstelperiode na de operatie, laparoscopische interventies en het verwijderen van organen. In otdleniyah chirurgie, etterende chirurgie dergelijk onderzoek noodzakelijk is, aangezien er al snel ontwikkelt ustoychivost.krome op het ontwikkelen van superstable "nosocomiale" Veel particuliere klinieken zijn geschikt voor geneesmiddelen op recept met volledige verantwoordelijkheid - pas na testen van de gevoeligheid. In veel gevallen staat het budget van openbare instellingen eenvoudigweg niet toe dat dergelijke onderzoeken worden uitgevoerd voor elke patiënt die antibiotische therapie nodig heeft.
Voorbereiding
Voorbereiding op het onderzoek vereist geen speciale maatregelen. Het is hetzelfde als in elke analyse. Een paar dagen voor het onderzoek moet je afzien van alcoholgebruik. In de ochtend, de dag van bemonstering, kun je in de meeste gevallen niet eten en drinken. Maar het hangt allemaal af van het type analyse. Het materiaal voor de studie kan verschillen, afhankelijk van de ziekte.
Bij aandoeningen van de keel, luchtwegen, neem een wattenstaafje uit de keel, neus. In venereology, gynaecologie, urologie, neem voor analysezwabbers van de geslachtsdelen, bloed. Bij een nieraandoening is vaak urine nodig. Met ziekten van het spijsverteringskanaal, sommige besmettelijke ziekten, onderzoek de uitwerpselen, braaksel. Soms kunnen moedermelk, nasale afscheiding, oogafscheiding, speeksel, sputum worden onderzocht. Bij ernstige pathologieën en verdenkingen van het infectieuze proces wordt zelfs spinale vloeistof onderzocht. Het spectrum is breed genoeg.
De aard van de materiaalinname wordt bepaald door de biologische verwantschap. Dus urine, ontlasting, wordt 's ochtends verzameld in een schone container of in een speciale container voor biologisch materiaal. De verzameling moedermelk wordt voorafgaand aan de voeding uitgevoerd. De studie neemt een gemiddeld deel. Het uitstrijkje wordt ingenomen met een speciale tampon, die op het slijmvlies wordt gedragen en vervolgens met een geprepareerd medium in een reageerbuis wordt neergelaten. Bloed wordt verzameld in een reageerbuis, van een vinger of een ader. Bij het nemen van uitstrijkjes uit de urethra of de vagina, wordt aanbevolen om zich gedurende meerdere dagen te onthouden van geslachtsgemeenschap.
Bij het verzamelen van biologisch materiaal voor onderzoek, is het eerst noodzakelijk om de juistheid van het hek en de steriliteit te waarborgen. Maar dit is in de meeste gevallen de zorg van medisch personeel, de patiënt moet zich hier geen zorgen over maken. Meestal wenden gynaecologen en urologen zich tot vergelijkbare onderzoeken, op de tweede plaats - otolaryngologen bij de behandeling van ziekten van de nasopharynx en farynx, bovenste luchtwegen.
Met wie kun je contact opnemen?
Techniek testen op gevoeligheid voor antibiotica
Het verzamelde biologische materiaal wordt onder steriele omstandigheden afgeleverd aan het laboratorium, waar verder onderzoek wordt uitgevoerd. In de eerste plaats wordt het primaire zaaien uitgevoerd op universele voedingsmedia. Ook wordt een deel van het materiaal voor microscopisch onderzoek genomen. Een uitstrijkje voor microscopie wordt voorbereid, er wordt een onderzoek uitgevoerd, waarmee een geschat beeld kan worden bepaald, wat suggereert welke micro-organismen in het monster aanwezig zijn. Dit maakt het mogelijk om de meest optimale omgevingen te plaatsen voor verder onderzoek en identificatie van micro-organismen. Ook kunnen er op de microscoop tekenen zijn die duiden op ontsteking, een oncologisch proces.
Gedurende een aantal dagen in de petrischaal groeien kolonies van micro-organismen. Vervolgens worden verschillende kolonies ingenomen, deze worden gekruist in selectieve voedingsmedia, die het mogelijk maken om een benaderde groep van micro-organismen te bepalen. Incubeer voor meerdere dagen in een thermostaat, ga dan verder met identificeren (bepaal het type micro-organismen). Identificatie wordt uitgevoerd met behulp van speciale biochemische en genetische tests, determinanten. Bovendien kan immunologische follow-up worden uitgevoerd.
Nadat het belangrijkste pathogeen geïsoleerd is, voert u een beoordeling uit van de gevoeligheid voor antibiotica. Hiervoor zijn verschillende methoden. De meest gebruikte methode voor seriële verdunning of schijfdiffusiemethode. Technieken zijn gedetailleerd in microbiologische naslagwerken, methodologische richtlijnen en laboratoriumnormen.
De essentie van de disco-diffusie methode bestaat uit het zaaien van micro-organismen die zijn geïdentificeerd op het voedingsmedium, speciale schijven geïmpregneerd met antibiotica zijn bovenop geplaatst. Binnen een paar dagen wordt het gewas geïncubeerd in een thermostaat, waarna de resultaten worden gemeten. Schat de mate van vertraging van bacteriële groei door elk antibioticum. Als de bacterie gevoelig is voor het antibioticum, wordt een "lysiszone" rond de schijf gevormd, waarin de bacteriën zich niet voortplanten. Hun groei is langzaam of volledig afwezig. De diameter van de groeivertragingszone wordt bepaald door de mate van gevoeligheid van het micro-organisme voor het antibioticum en formuleert verdere aanbevelingen.
De seriële verdunningsmethode is het meest nauwkeurig. Om dit te doen, worden micro-organismen gezaaid op vloeibare voedingsmedia, voeg een antibioticum toe dat is verdund in het systeem van decimale verdunningen. Hierna worden de buizen enkele dagen in een thermostaat geplaatst voor incubatie. Gevoeligheid voor antibiotica wordt bepaald door de mate van groei van bacteriën in de voedingsbodem met de toevoeging van een antibioticum. Noteer de minimale concentratie waarbij de groei van micro-organismen nog steeds plaatsvindt. Dit is de minimale dosering van het geneesmiddel (herberekening van microbiologische eenheden naar de werkzame stof is noodzakelijk).
Dit zijn de standaard microbiologische methoden die ten grondslag liggen aan elk onderzoek. Ze impliceren de handmatige uitvoering van alle manipulaties. Tegenwoordig zijn veel laboratoria uitgerust met speciale apparatuur die al deze procedures in een automatische modus uitvoert. Een specialist die met dergelijke apparatuur werkt, heeft alleen de mogelijkheid nodig om met apparatuur te werken, veiligheidsvoorschriften en steriliteit in acht te nemen.
Er moet rekening worden gehouden met het feit dat de gevoeligheidsindexen in het laboratorium en in de omstandigheden van een levend organisme sterk verschillen. Daarom wordt een hogere dosering aan een persoon voorgeschreven dan tijdens de studie werd vastgesteld. Dit komt door het feit dat het lichaam niet zulke optimale omstandigheden heeft voor de groei van bacteriën. In het laboratorium worden "ideale omstandigheden" gecreëerd. Een deel van het medicijn kan worden geneutraliseerd door de werking van speeksel, maagsap. Het deel wordt in het bloed geneutraliseerd door antilichamen en antitoxinen, die worden geproduceerd door het immuunsysteem.
Urine-analyse op gevoeligheid voor antibiotica
Om te beginnen wordt biologisch materiaal verzameld. Om dit te doen, moet u een gemiddeld deel van de ochtendurine verzamelen en afleveren aan het laboratorium. Het is belangrijk om steriliteit waar te nemen en geen antibiotica te nemen enkele dagen voor de analyse, anders kunt u een vals negatief resultaat krijgen. Hierna wordt een standaard gewas geproduceerd, waarvan de essentie is om de zuivere kweek van de ziekteverwekker te isoleren en een antibioticum te selecteren dat het beste bacteriedodende effect zal hebben. De noodzakelijke concentratie van antibioticum wordt bepaald.
De analyse van urine wordt meestal voorgeschreven voor vermoedelijke infectieuze en inflammatoire processen in het urogenitale systeem, met immunodeficiënties en metabole stoornissen. Normaal gesproken is urine een steriele vloeistof. De duur van een dergelijk onderzoek is 1-10 dagen en wordt bepaald door de groeisnelheid van het micro-organisme.
Analyse voor kweek en gevoeligheid voor antibiotica
De studie impliceert de isolatie van een micro-organisme, dat de veroorzaker is van een zuivere cultuur. Soms kunnen dergelijke micro-organismen verschillende (gemengde infectie) zijn. Sommige micro-organismen zijn in staat om biofilms te vormen, wat eigenaardige "microbiële gemeenschappen" zijn. Overleven van biofilms is veel hoger dan afzonderlijke micro-organismen of associaties. Bovendien kunnen niet alle antibiotica de biofilm beïnvloeden en doordringen.
Om het pathogeen te bepalen, de isolatie in een zuivere cultuur, wordt het zaaien uitgevoerd. Tijdens het onderzoek worden verschillende gewassen geteeld, in verschillende voedingsmedia. Vervolgens wordt een zuivere cultuur toegewezen, de biologische significantie bepaald en de gevoeligheid voor antibacteriële geneesmiddelen bepaald. De optimale concentratie is geselecteerd.
Voor de studie kan elk biologisch materiaal worden gebruikt, afhankelijk van de ziekte, lokalisatie van het infectieuze proces. De duur wordt bepaald door de groeisnelheid van micro-organismen.
[15], [16], [17], [18], [19], [20]
Fecale analyse voor gevoeligheid
De uitwerpselen worden onderzocht op verschillende maag- en darmziekten, met een vermoeden van een infectieus proces, bacteriële intoxicatie, voedselvergiftiging. Het doel van de studie is om de ziekteverwekker te isoleren en de optimale antibacteriële geneesmiddelen te selecteren die zeer actief zullen zijn. Het belang van dit type onderzoek is dat het mogelijk is om een medicijn te kiezen dat alleen de veroorzaker van de ziekte beïnvloedt, en dat het geen invloed heeft op de vertegenwoordigers van de normale microflora.
De eerste en zeer belangrijke fase is de verzameling ontlasting. Het moet worden verzameld in een speciale steriele container, in de ochtenduren. Niet langer dan 1-2 uur bewaren. Vrouwen met menstruatie moeten de analyse tot het einde uitstellen, omdat de nauwkeurigheid van de resultaten zal veranderen. Het materiaal wordt afgeleverd aan het laboratorium voor onderzoek. De analyse wordt uitgevoerd met behulp van de standaard microbiologische techniek van inoculatie en de isolatie van zuivere kweek. Bovendien wordt een antibioticogram uitgevoerd. Volgens de conclusie worden aanbevelingen ontwikkeld, een nader onderzoeksschema bepaald.
Analyse voor dysbiose met gevoeligheid
Het materiaal voor de studie is de uitwerpselen die onmiddellijk na de defaecatie worden genomen. Normale gastro-intestinale microflora bestaat uit vertegenwoordigers van normale flora en verschillende vertegenwoordigers van pathogene flora. Hun soortensamenstelling, hoeveelheid en correlatie worden strikt gemarkeerd en binnen de toegestane norm gehouden. Als een dergelijke verhouding wordt geschonden, ontwikkelt zich dysbacteriose. Het kan zich op verschillende manieren manifesteren. Besmettelijke ziekten kunnen zich ontwikkelen als de hoeveelheid pathogene microflora sterk toeneemt. Als de hoeveelheid van een micro-organisme drastisch afneemt, nemen andere vertegenwoordigers een vrije plaats in, die niet kenmerkend zijn voor het maag-darmkanaal, of pathogeen. Vaak wordt een lege stoel bezet door een schimmel, waarna verschillende schimmellaesies ontstaan, candidiasis.
Om de kwantitatieve en kwalitatieve samenstelling van de darmmicroflora te bepalen, worden de feces geanalyseerd op dysbacteriose. Voorwaardelijk zijn alle vertegenwoordigers van de darm verdeeld in drie groepen: pathogeen, opportunistisch en niet-pathogeen. Dienovereenkomstig bestaat de analyse uit drie delen. Elke groep micro-organismen heeft zijn behoeften in de bron van voeding, energie. Voor elke groep zijn afzonderlijke voedingsmedia en selectieve additieven nodig.
Eerst worden microscopie en primair zaaien uitgevoerd. Na het zaaien worden de grootste kolonies geselecteerd, morfologisch vergelijkbaar met de vertegenwoordigers van elke groep. Geproduceerd door opnieuw te settelen op selectieve media. Nadat de micro-organismen zijn gegroeid, worden ze geïdentificeerd en onmiddellijk getest op gevoeligheid voor het antibioticum. Standaard microbiologische methoden worden gebruikt.
De studie van een groep pathogene micro-organismen omvat, naast standaardstudies, de identificatie van bacteriën van tyfus, paratyfus en dysenterie. Er wordt ook bepaald of een persoon drager is van deze micro-organismen. Een uitgebreid onderzoek naar dysbiose omvat ook een studie van vertegenwoordigers van de groep van bifidobacteriën en lactobacilli. De studie duurt ongeveer een week en is afhankelijk van de groeisnelheid van micro-organismen.
Analyse voor gevoeligheid voor bacteriofagen
Bij darminfecties voor behandeling werden vaak bacteriofagen gebruikt in plaats van antibiotica. Bacteriofagen zijn virussen van bacteriën die alleen voor hen vatbaar zijn. Ze vinden een bacterie waarmee ze complementair zijn, dringen erin door en vernietigen geleidelijk de bacteriecel. Als gevolg hiervan stopt het infectieproces. Maar niet alle bacteriën zijn gevoelig voor bacteriofagen. Om te controleren of deze bacteriofaag activiteit vertoont tegen vertegenwoordigers van de microflora, moet een analyse worden uitgevoerd.
Het materiaal van de studie is cal. De analyse moet binnen een uur aan het laboratorium worden geleverd, anders is dit niet mogelijk. Het is noodzakelijk om de analyse in meerdere replicaten uit te voeren. De originele techniek is vergelijkbaar met die bij het bepalen van de gevoeligheid voor antibiotica. Eerst wordt een voorlopige microscopie van het monster uitgevoerd, daarna primair zaaien op universele voedingsmedia. Vervolgens wordt een selectieve kweek geproduceerd op selectieve voedingsmedia.
Het belangrijkste werk wordt uitgevoerd met pure cultuur. Ze worden behandeld met verschillende soorten bacteriofagen. Als de kolonie oplost (gelyseerd), duidt dit op een hoge activiteit van de bacteriofaag. Als de lysis gedeeltelijk optreedt, werkt de bacteriofaag matig. Bij afwezigheid van lysis kan men spreken van resistentie tegen een bacteriofaag.
Het voordeel van faagtherapie is dat bacteriofagen geen invloed hebben op het menselijk lichaam en geen bijwerking veroorzaken. Ze hechten zich vast aan bepaalde soorten bacteriën en lyseren ze. Het nadeel is dat ze heel specifiek zijn en een selectief effect hebben en zich niet altijd aan bacteriën kunnen hechten.
[30], [31], [32], [33], [34], [35], [36], [37], [38]
Sputum-analyse op gevoeligheid voor antibiotica
De analyse is een studie van de afneembare onderste luchtwegen. Het doel is om het type micro-organismen te bepalen dat fungeert als een veroorzaker van de ziekte. Een antibioticum wordt ook uitgevoerd. In dit geval wordt de gevoeligheid van het pathogeen voor antibiotica bepaald en wordt de optimale concentratie geselecteerd. Het wordt gebruikt voor luchtwegaandoeningen.
Onderzoek naar sputum en andere inhoud van de longen en bronchiën is nodig om een therapieschema te kiezen, voor het onderscheiden van verschillende diagnoses. Het wordt gebruikt om de aanwezigheid van tuberculose te bevestigen of te ontkennen.
Eerst moet je biologisch materiaal krijgen. Het kan worden verkregen door hoesten, door expectoratie of door de luchtpijp te halen met bronchoscopie. Er zijn speciale spuitbussen die bijdragen aan slijm. Voordat u sputum inneemt, moet de mond worden afgespoeld met water, waardoor de bacteriële besmetting van de mondholte afneemt. Eerst wordt aangeraden om 3 keer diep in te ademen, om een productieve hoest te produceren. Sputum kan ook worden ingenomen door aspiratie uit de luchtpijp. In dit geval wordt een speciale katheter in de luchtpijp gestoken. Wanneer bronchoscopie wordt geïntroduceerd in de holte van de bronchus bronchoscoop. In dit geval wordt het slijmvlies met een verdovingsmiddel gesmeerd.
Vervolgens wordt het materiaal ter studie aan het laboratorium afgeleverd. Zaaien wordt uitgevoerd volgens het standaardschema, microscopie. Vervolgens wordt een zuivere cultuur geïsoleerd en worden verdere manipulaties daarmee uitgevoerd. Er wordt een antibioticogram geplaatst, waarmee het spectrum van bacteriegevoeligheid kan worden geïdentificeerd en de optimale dosering kan worden geselecteerd.
Als verdacht wordt van tuberculose, wordt slijm 's morgens drie dagen onderzocht. Wanneer getest op tuberculose, zal het resultaat binnen 3-4 weken klaar zijn. Omdat mycobacterium tuberculosis, het veroorzakende agens van de ziekte, erg langzaam groeit.
Normaal gesproken moeten vertegenwoordigers van de normale microflora van de luchtwegen worden gevonden. Het is ook noodzakelijk om er rekening mee te houden dat met verminderde immuniteit de parameters van normale microflora kunnen verschillen.
Analyse van spermegevoeligheid voor antibiotica
Het is een bacteriologische studie van sperma-ejaculaat met verdere selectie van gevoelige antibiotica en hun concentraties. Meestal wordt het uitgevoerd bij de behandeling van onvruchtbaarheid en andere ziekten van het mannelijke voortplantingssysteem. In het geval dat de ziekte gepaard gaat met een infectieus proces. De belangrijkste oorzaak van onvruchtbaarheid bij de man is in de meeste gevallen de infectie. Meestal wordt eerst een spermogram gemaakt. Aan de hand van resultaten wordt de vruchtbaarheidscapaciteit van het sperma bepaald. Als deze analyse een groot aantal witte bloedcellen vertoont, kunnen we het hebben over het ontstekingsproces. Tegelijkertijd wordt microbiologische analyse meestal onmiddellijk voorgeschreven, omdat ontsteking bijna altijd gepaard gaat met een infectie. Op basis van de verkregen resultaten wordt een geschikte therapie geselecteerd. Het onderzoek wordt meestal voorgeschreven door de androloog.
De reden voor de analyse is ook prostatitis, geslachtsziekten. Toewijzen en in het geval dat een partner een seksueel overdraagbare aandoening heeft.
De juiste analyse is in de eerste plaats gebaseerd op de juiste selectie van biologisch materiaal. Neem het materiaal in speciale vaten met een brede keel. De opslagtemperatuur moet overeenkomen met de temperatuur van het menselijk lichaam. In dit geval kan het materiaal niet langer dan een uur worden bewaard. In bevroren vorm kan niet meer dan een dag worden bewaard. Tijdens de ontvangst van antibiotica is het zaaien niet raadzaam, dit verandert het ziektebeeld. Meestal wordt het gewas overgegeven voordat de antibioticatherapie is gestart. Of stop 2-3 dagen voor de test met het innemen van medicijnen.
Vervolgens wordt het op een voedingsbodem gezaaid. Incubeer in de thermostaat gedurende 1-2 dagen. Nadat een schone cultuur is geïsoleerd, wordt de identificatie uitgevoerd, de gevoeligheid bepaald en het type en de groeisnelheid van elke kolonie. Gevoeligheid voor antibiotica wordt bepaald in het geval van detectie van pathogene micro-organismen. Gemiddeld is de analyse 5-7 dagen voltooid.
Analyse voor gevoeligheid voor gluten
Er zijn veel testen waarmee u de immunologische gevoeligheid voor verschillende stoffen of ziekteverwekkers kunt bepalen. Eerder was de belangrijkste methode om tests uit te voeren op basis van de agglutinatiereactie van antilichamen en antigenen. Tegenwoordig worden deze tests steeds minder gebruikt, omdat hun gevoeligheid veel lager is dan bij veel moderne technieken, zoals gluten-testen. Meestal in de praktijk toevlucht tot een speeksel test voor gluten en analyse van ontlasting.
De gluten gevoeligheidstest wordt gebruikt om verschillende aandoeningen van de darm te diagnosticeren. Het is gebaseerd op de reactie van het immuunsysteem. Als gluten aan de ontlasting wordt toegevoegd, vindt de reactie plaats of is deze afwezig. Dit wordt beschouwd als een fout-positief of fout-negatief resultaat. Positief duidt op een aanleg voor colitis, een hoge waarschijnlijkheid van zijn ontwikkeling. Bevestigt ook coeliakie.
Gluten kan ook worden geanalyseerd met behulp van speeksel als biologisch materiaal. Je kunt de hoeveelheid antilichamen tegen gliadine meten. Een positief resultaat duidt op een gevoeligheid voor gluten. Dit kan wijzen op een hoge kans op diabetes. Als het resultaat in beide tests positief is, kun je iabet- of coeliakie bevestigen.
Een analyse van de gevoeligheid van chlamydia voor antibiotica
De analyse wordt uitgevoerd bij de behandeling van infectieuze en inflammatoire ziekten van het urogenitale kanaal, met verdenking van chlamydia. Het materiaal voor de studie schraapt uit het vaginale slijmvlies - bij vrouwen, een uitstrijkje van de urethra - bij mannen. Het hek wordt in de behandelkamer gemaakt met wegwerpapparatuur. Het is belangrijk om steriliteit waar te nemen. Voordat u het materiaal inneemt, dient u zich binnen 1-2 dagen voor aanvang van de studie van intimiteit te onthouden. Als een vrouw menstruatie heeft, wordt het materiaal 3 dagen na haar volledige stopzetting ingenomen.
Het materiaal wordt afgeleverd aan het laboratorium. Volledige analyse omvat voorlopige microscopie van uitstrijkjes. Dit maakt het mogelijk om de microflora visueel te bepalen door morfologische kenmerken, om de voedingsmedia correct te selecteren. Het gehalte aan slijm, pus, deeltjes van het epitheel, kan direct of indirect de ontwikkeling van het ontstekingsproces of de maligne celdegeneratie aangeven.
Vervolgens wordt het primaire gewas geproduceerd. De kweek wordt enkele dagen onder een thermostaat geïncubeerd en wordt geïdentificeerd door kweken. Vervolgens wordt het geproduceerd door opnieuw te bezinken op selectieve voedingsmedia die bedoeld zijn voor de kweek van chlamydia. De resulterende kolonies worden geïdentificeerd met behulp van biochemische tests. Na het bepalen van de gevoeligheid voor antibiotica met standaardmethoden. Kies het meest gevoelige antibioticum, de concentratie ervan. Voor de kweek van chlamydia zijn speciale media nodig, speciaal ontworpen voor dit type micro-organismen, die alle noodzakelijke stoffen en groeifactoren bevatten.
Het is ook mogelijk om een biologische studie uit te voeren. Hiertoe infecteert u de veroorzaker van ratten. In sommige laboratoria wordt een speciaal gegroeide weefselkweek gebruikt in plaats van ratten. Dit komt door het feit dat chlamydia intracellulaire parasieten zijn en voor hun cultivatie zijn speciale omstandigheden nodig. De micro-organismen worden vervolgens bepaald door de PCR-methode. Om de gevoeligheid te bepalen, wordt een transplantatie uitgevoerd naar een selectief kweekmedium voor chlamydia, na enkele dagen worden de resultaten geregistreerd. Op resistentie of gevoeligheid wordt beoordeeld door het onderdrukken van infectie in cellen.
[46], [47], [48], [49], [50], [51], [52], [53], [54]
Hoeveel is de gevoeligheidstest voor antibiotica gedaan?
Gemiddeld wordt de analyse binnen 5-7 dagen uitgevoerd. Sommige tests worden langer gedaan. Bij het diagnosticeren van tuberculose moeten de resultaten bijvoorbeeld van 3 weken tot een maand worden verwacht. Alles hangt af van de groeisnelheid van micro-organismen. Vaak hebben laboratoriummedewerkers te maken met gevallen waarin patiënten worden gevraagd de analyse sneller uit te voeren. En ze bieden zelfs een "toeslag" voor urgentie. Hier moet echter worden begrepen dat niets afhangt van de activiteiten van de laboratoriumassistent in dit geval. En het hangt alleen af van hoe snel het micro-organisme groeit. Elke soort heeft zijn eigen, strikt gedefinieerde groeisnelheid.
Normale prestaties
Er zijn geen indicatoren voor een absolute universele standaard voor alle analyses. Ten eerste kunnen voor elk biotoop deze indicatoren verschillen. Ten tweede zijn ze individueel voor elk micro-organisme. Dat wil zeggen, de snelheden van de norm van hetzelfde micro-organisme, bijvoorbeeld, voor de keel en darm verschillen. Dus, als de stafylokok de overhand heeft in de keel als een vertegenwoordiger van normale microflora, dan wordt de darm gedomineerd door E. Coli, bifido- en lactobacilli. Aanzienlijk verschillende indicatoren voor hetzelfde micro-organisme in verschillende biotopen. Bijvoorbeeld, candida kan normaal gesproken worden bevat in een bepaalde hoeveelheid in de urogenitale microflora. In de mondholte zijn ze normaal niet ingesloten. De penetratie van candida in de mondholte kan wijzen op hun kunstmatige afwijking van hun natuurlijke habitat.
Urine, bloed, hersenvocht zijn biologische media die normaal gesproken steriel zouden moeten zijn, dat wil zeggen dat ze geen microflora zouden moeten bevatten. De aanwezigheid van microflora in deze vloeistoffen duidt op een sterk inflammatoir, infectueus proces en duidt ook op een risico van bacteriëmie en sepsis.
Over het algemeen is er een classificatie bij benadering. De meeteenheid in de microbiologie is KOE / ml, dat wil zeggen, het aantal kolonievormende eenheden in 1 milliliter biologische vloeistof. De mate van zaaien wordt bepaald door het aantal CFE's en varieert over een breed bereik van 10 1 tot 109. Bijgevolg, 10 1 - het minimum aantal micro-organismen, 109 - een ernstige mate van infectie. De indicator opmerkelijk is een bereik tot 10 3 alle bedragen boven deze geven aan abnormale proliferatie van bacteriën.
Wat betreft de gevoeligheid voor antibiotica, alle micro-organismen zijn verdeeld in stabiel, matig gevoelig, gevoelig. Vaak wordt dit resultaat uitgedrukt als een kwalitatief kenmerk met aanduiding van MIG - de minimale remmende dosis van een antibioticum dat nog steeds de groei van het micro-organisme remt. Voor elke persoon, zoals voor elk micro-organisme, zijn deze indicatoren strikt individueel.
Het apparaat voor analyse
Bij bacteriologische onderzoeken, vooral met de definitie van gevoeligheid voor antibiotica, zal één apparaat niet voldoende zijn. Een volledige, uitgebreide uitrusting van het bacteriologisch laboratorium is noodzakelijk. Het is noodzakelijk om zorgvuldig de apparatuur te plannen en te selecteren die overeenkomt met elke onderzoeksfase. In het stadium van bemonstering van biologisch materiaal zijn steriele instrumenten, dozen, bixen, containers, opslagkamers en transportapparatuur nodig om materiaal aan het laboratorium af te leveren.
Allereerst is een hoogwaardige microscoop voor uitstrijkmicroscopie nodig in het laboratorium. Tegenwoordig is er een groot aantal microscopen, die een verscheidenheid aan eigenschappen hebben - van de traditionele licht- tot de fasecontrast- en atoomkrachtmicroscoop. Met moderne apparatuur kunt u een afbeelding scannen in een driedimensionale ruimte en deze met grote nauwkeurigheid en met grote vergroting bekijken.
In het stadium van planten en incubatie van micro-organismen kunnen autoclaven, droogverbrandende kasten, exsiccators, stoombaden en een centrifuge nodig zijn. Een thermostaat is essentieel, waarin de belangrijkste incubatie van biologisch materiaal plaatsvindt.
In het stadium van de identificatie van micro-organismen en de uitvoering van een antibioticogram kunnen micromanipulatoren, massaspectrometers, spectrofotometers, colorimeters voor verschillende tellingen en schattingen van de biochemische eigenschappen van culturen nodig zijn.
Bovendien kunnen moderne laboratoria worden uitgerust met hightechapparatuur die alle bovengenoemde hoofdfasen van het onderzoek uitvoert, tot de berekening van de resultaten in een automatische modus. Tot dergelijke apparaten behoren bijvoorbeeld een complexe inrichting van een bacteriologisch laboratorium gebaseerd op een time-of-flight massaspectrometer. Met deze reeks apparaten kan het hele laboratorium in drie zones worden verdeeld. De eerste zone is vies, waarin de analyse wordt uitgevoerd, registratie. De tweede zone is een werkzone, waarin ze in feite basis microbiologische studies uitvoeren. En de derde zone - sterilisatie en autoclaaf, waar de voorbereiding en het gebruik van werkmateriaal wordt uitgevoerd.
Modellen maken het mogelijk om te incuberen onder een breed bereik van temperaturen en omstandigheden. De ingebouwde analyzer van bloed en andere biologische monsters bevat de resultaten met hoge nauwkeurigheid en betrouwbaarheid. Het pakket omvat elektronische weegschalen, bidistillyatory, centrifuges, kasten autoclaven, automatische sredovarka waterbad met ingebouwde roerinrichting, pH meter, thermometer en microscopen.
Ook wordt een microbiologische analysator gebruikt, waarin testmonsters, voedingsmedia, testsets voor het bepalen van de gevoeligheid worden gelegd. Het apparaat voert de nodige onderzoeken uit en geeft een kant-en-klare conclusie.
Verhogen en verlagen van waarden
Het decoderen van de analyse kan alleen door een arts worden gedaan. Maar vaak hebben patiënten, na een resultaat in hun handen gekregen te hebben, paniek en een groot aantal onbegrijpelijke symbolen en figuren opgemerkt. Om niet verloren te gaan, is het raadzaam om op zijn minst een algemeen idee te hebben van hoe de analyse moet worden ontcijferd op gevoeligheid voor antibiotica. Gewoonlijk geeft het eerste item in de resultaten de naam van het micro-organisme aan, dat de veroorzaker is van de ziekte. De naam is in het Latijn. Ook kan hier een vertegenwoordiger van normale microflora worden genoemd die in het lichaam de boventoon voert, dus raak niet in paniek. Het tweede item geeft de mate van zaaien aan, dat wil zeggen de hoeveelheid micro-organismen. Gewoonlijk varieert dit aantal van 10 1 tot 10 9. Het derde item geeft de vorm van pathogeniteit aan, en de vierde - de namen van antibacteriële geneesmiddelen waarop dit micro-organisme gevoelig is. De minimale remmende concentratie waarbij de groei van het micro-organisme wordt onderdrukt wordt hierna aangegeven.