Trombocytenaggregatie met ristocetine (von Willebrand factor )

Referentiewaarden (norm) van de von Willebrandfactoractiviteit zijn 58-166%.

Von Willebrandfactor wordt gesynthetiseerd door endotheelcellen en megakaryocyten. Het is noodzakelijk voor normale bloedplaatjesadhesie en kan de halfwaardetijd van factor VIII verlengen. Plasmacoagulatiefactor VIII - antihemofilieglobuline A - circuleert in het bloed als een complex van drie subeenheden: VIII-k (coagulerende eenheid), VIII-Ag (de belangrijkste antigeenmarker) en VIII-vWF (von Willebrandfactor geassocieerd met VIII-Ag). Men vermoedt dat von Willebrandfactor de synthese van het coagulerende deel van antihemofilieglobuline A (VIII-k) reguleert en betrokken is bij de hemostase van vasculaire bloedplaatjes.

De ziekte van Von Willebrand is een erfelijke aandoening die wordt gekenmerkt door een langere bloedingstijd, een verminderde activiteit van de ristocetine-cofactor en een verminderde (in verschillende mate) stollingsactiviteit van factor VIII. De klinische verschijnselen van de ziekte zijn vergelijkbaar met die van trombocytopathie. Patiënten met een significant verminderde factor VIII-activiteit kunnen echter hematomen en hemartrose ervaren.

Op basis van laboratoriumonderzoek waarmee de structuur en activiteit van de von Willebrandfactor bepaald kan worden, worden de volgende vormen van de ziekte onderscheiden.

• Type I (70% van alle gevallen) wordt gekenmerkt door een lichte afname van de ristocetinecofactor (von Willebrandfactor) en de stollingsactiviteit (VIII-k) met een normale macromoleculaire structuur van de von Willebrandfactor.
• Type II: berust op een selectief tekort aan hoogmoleculaire polymeren van von Willebrandfactor als gevolg van verstoringen in de structuur van dit eiwit.
  • Type IIB wordt veroorzaakt door een toegenomen interactie tussen von Willebrandfactor en bloedplaatjes. Een toegenomen verwijdering van bloedplaatjesaggregaten leidt tot trombocytopenie.
• Type III wordt gekenmerkt door een ernstig kwantitatief tekort aan von Willebrandfactor, wat resulteert in een klinisch significante afname van de factor VIII-activiteit (VIII-k).

Het gehalte aan von-willebrandfactor wordt bepaald in gevallen waarbij de bloedingstijd is toegenomen, het aantal bloedplaatjes binnen de referentiewaarden ligt en er geen duidelijke oorzaken zijn voor een disfunctie van de bloedplaatjes. Om de von-willebrandfactor te beoordelen, wordt het kwantitatieve gehalte bepaald (een onderzoek naar de activiteit van de ristocetine-cofactor), worden ristocetine-geïnduceerde bloedplaatjesagglutinatie en de antigene structuur van von-willebrandfactor geassocieerd met factor VIII (VIII-vWF) bestudeerd.

Bepaling van de bloedplaatjesaggregatie met ristocetine in plasma wordt gebruikt voor de kwantitatieve bepaling van von Willebrandfactor. Er is een lineair verband vastgesteld tussen de mate van ristocetineaggregatie en de hoeveelheid von Willebrandfactor. De methode is gebaseerd op het vermogen van dit antibioticum (ristocetine) om in vitro de interactie van von Willebrandfactor met bloedplaatjesglycoproteïne Ib te stimuleren. In de meeste gevallen van de ziekte van von Willebrand wordt een verminderde ristocetineaggregatie waargenomen met een normale respons op ADP, collageen en adrenaline. Verstoorde ristocetineaggregatie wordt ook gedetecteerd bij Bernard-Soulier macrocytaire trombodystrofie (afwezigheid van ristocetineaggregatiereceptoren op het bloedplaatjesmembraan). Voor de differentiatie wordt een test met de toevoeging van normaal plasma gebruikt: bij de ziekte van von Willebrand normaliseert de ristocetineaggregatie na toevoeging van normaal plasma, terwijl dit niet gebeurt bij het Bernard-Soulier-syndroom.

De studie kan ook worden gebruikt voor de differentiële diagnose van hemofilie A (factor VIII-deficiëntie) en de ziekte van Von Willebrand. Bij hemofilie is het gehalte VIII-k sterk verlaagd en ligt het gehalte VIII-fB binnen de normale waarden. Klinisch manifesteert dit verschil zich doordat bij hemofilie een hematoomtype met verhoogde bloedingen optreedt, en bij de ziekte van Von Willebrand een petechiën-hematoomtype.

De door ristocetine geïnduceerde bloedplaatjesagglutinatie is bij de meeste gevallen van de ziekte van von Willebrand verminderd, behalve bij type IIB.

De antigene structuur van von Willebrand factor geassocieerd met factor VIII (VIII-vWF) wordt gedetecteerd met verschillende immunologische methoden, en de verdeling van von Willebrand factor naar molecuulgrootte wordt bepaald met agarosegelelektroforese. Deze testen worden gebruikt om het type ziekte van von Willebrand vast te stellen.

Het onderzoek naar bloedplaatjesaggregatie met verschillende inductoren wordt niet alleen uitgevoerd om stoornissen in de bloedplaatjesaggregatiefunctie te identificeren. Deze studie maakt het mogelijk om de effectiviteit van antitrombocytentherapie te evalueren, individuele medicijndoseringen te selecteren en medicatiemonitoring uit te voeren.

[ 1 ], [ 2 ], [ 3 ], [ 4 ], [ 5 ], [ 6 ], [ 7 ], [ 8 ], [ 9 ], [ 10 ], [ 11 ]