Bacterioscopische analyse van sputum

Tijdige identificatie van de infectieuze agens is van groot belang voor de juiste keuze van antibacteriële middelen om de ontwikkeling van bacteriële resistentie te voorkomen wanneer een antibioticum empirisch wordt voorgeschreven. Gramkleuring is de meest gebruikte methode voor het kleuren van alle soorten materiaal dat van een patiënt wordt verkregen (sputum, bronchoalveolaire lavage, enz.) voor snelle en accurate identificatie van de infectieuze agens.

Een voorlopige beoordeling van een mogelijke verwekker wordt uitgevoerd met behulp van bacterioscopie van een Gram-gekleurd sputumuitstrijkje. Een Gram-gekleurd sputumuitstrijkje wordt onderzocht voordat het op voedingsmedia wordt geënt, ook om de geschiktheid voor kweek te beoordelen en de waarschijnlijke ziekteverwekker te identificeren. Sputum wordt als geschikt beschouwd als er meer dan 25 leukocyten en minder dan 10 epitheelcellen in het Gram-gekleurde uitstrijkje worden gevonden bij lage vergroting onder een microscoop. Tekenen van een hoogwaardig sputummonster dat geschikt is voor kweek, zijn onder andere een overwicht van leukocyten ten opzichte van epitheelcellen, evenals de aanwezigheid van bacteriën van één soort die zich in of rond de leukocyten bevinden. Grampositieve bacteriën in het preparaat zijn donkerblauw en gramnegatieve bacteriën roze. De verwekkers van atypische pneumonie (mycoplasma, legionella, rickettsia en chlamydia) worden niet met Gram gekleurd, daarom worden voornamelijk serologische methoden gebruikt om ze op te sporen.

Sputumuitstrijkjes volgens Ziehl-Neelsen worden gebruikt voor de identificatie van zuurvaste bacillen, voornamelijk tuberculosemycobacteriën. Het preparaat wordt bereid uit purulente sputumdeeltjes, die op 4-6 verschillende plaatsen worden geselecteerd. De geselecteerde deeltjes worden zorgvuldig vermalen tussen twee objectglaasjes tot een homogene massa, aan de lucht gedroogd en boven een brander gefixeerd. Tuberculosemycobacteriën worden rood gekleurd, alle andere elementen van sputum en bacteriën worden blauw gekleurd. Tuberculosemycobacteriën zien eruit als dunne, licht gebogen staafjes van verschillende lengte, met verdikkingen aan de uiteinden of in het midden, in groepen of afzonderlijk. Detectie van tuberculosemycobacteriën is het meest betrouwbare teken van tuberculeuze longziekte. De Ziehl-Neelsen-uitstrijkjesmethode voor actieve vormen van longtuberculose heeft een sensitiviteit van 50% en een specificiteit van 80-85%.

[ 1 ], [ 2 ], [ 3 ], [ 4 ], [ 5 ], [ 6 ]