^

Gezondheid

Bloedonderzoek op de aanwezigheid van kankercellen in het lichaam: de naam hoe te passeren

, Medische redacteur
Laatst beoordeeld: 19.10.2021
Fact-checked
х

Alle iLive-inhoud wordt medisch beoordeeld of gecontroleerd op feiten om zo veel mogelijk feitelijke nauwkeurigheid te waarborgen.

We hebben strikte richtlijnen voor sourcing en koppelen alleen aan gerenommeerde mediasites, academische onderzoeksinstellingen en, waar mogelijk, medisch getoetste onderzoeken. Merk op dat de nummers tussen haakjes ([1], [2], etc.) klikbare links naar deze studies zijn.

Als u van mening bent dat onze inhoud onjuist, verouderd of anderszins twijfelachtig is, selecteert u deze en drukt u op Ctrl + Enter.

Tegenwoordig worden ze in de geneeskunde steeds vaker geconfronteerd met oncologische ziekten. Ondanks de brede verspreiding van kankertumoren, is het mechanisme van hun vorming en verspreiding nog onontgonnen. De verspreiding van kanker gebeurt ongelooflijk snel. Meestal zijn deze mensen blootgesteld aan de pensioengerechtigde leeftijd. Maar als vroeger deze ziekte voornamelijk als een ziekte van de oudere generatie werd beschouwd, dan is er tegenwoordig een tendens om de ziekte te verjongen. Deze ziekte treft jongeren, tieners en zelfs jonge kinderen. Het gevaar is dat kankertumoren absoluut alle organen kunnen aantasten. Ze groeien, en op een gegeven moment breekt de cel, valt in een ander weefsel, is gehecht. Als gevolg hiervan wordt een nieuwe tumor (metastase) gevormd. De ontwikkeling van tumoren en de vorming van metastasen kan worden voorkomen als de tumor tijdig wordt gedetecteerd en de nodige maatregelen worden genomen. De analyse van kankercellen  speelt een leidende rol bij de vroege diagnose van kwaadaardige tumoren.

Analyses bieden de mogelijkheid om een tumor te identificeren, een diagnose te stellen en, nog belangrijker, om tijdig te reageren. In de vroege stadia kan ontwikkeling nog steeds worden voorkomen. Maar meestal worden tumoren al in de late stadia gevonden, terwijl er vaak niets is dat de patiënt kan helpen. De moeilijkheid van de diagnose is dat in de vroege stadia de tumor bijna asymptomatisch ontwikkelt, en deze kan alleen worden gedetecteerd tijdens preventief onderzoek of tijdens laboratoriumtests.

Wat zijn de tests voor kankercellen?

Bij het uitvoeren van een kankertest wordt een algemeen objectief onderzoek uitgevoerd met behulp van verschillende instrumentele methoden, en laboratoriumtests worden ook gebruikt. Ten eerste krijgt de patiënt standaard klinische tests toegewezen. Hiervan kunt u een algemeen beeld krijgen van de processen die in het lichaam plaatsvinden. Maligne neoplasmata kunnen indirect een toename van het aantal leukocyten aangeven, evenals een toename van de ESR. Deze informatie is echter niet voldoende, omdat bij elke ziekte, infectieus of inflammatoir proces, deze indicatoren ook toenemen. Kanker kan ook duiden op een sterke afname van hemoglobine, vooral als je de indicatoren in dynamiek vergelijkt. Wanneer dergelijke tekens worden gedetecteerd, wordt een speciale studie toegewezen om kankercellen te detecteren.

Er wordt een uitgebreide bloedtest uitgevoerd, tijdens welke specifieke oncologische markers worden bepaald. Deze markers worden onmiddellijk gevormd, zelfs in het stadium van tumoroorsprong. Daarom maken ze het mogelijk om getransformeerde cellen en kankertumoren te identificeren in de beginstadia van hun vorming.

Het principe van de diagnostische methode is dat, met behulp van speciale testsystemen, kanker markers worden gedetecteerd in het bloed, die worden geproduceerd door kanker tumoren. Hoe zwaarder het stadium van de ziekte, hoe groter hun concentratie in het bloed. Het organisme van een gezond persoon produceert geen kankermarkers. Hun aanwezigheid is dus een directe bevestiging van een kankergezwel. Aan de hand van resultaten is het mogelijk om te oordelen over de grootte van een tumor, de variëteit en lokalisatie.

Indicaties voor de procedure analyse voor kankercellen

Onderzoek naar kankercellen wordt uitgevoerd met een verdenking van kanker, evenals met een preventief doel voor een vroege diagnose van kanker. Mensen die ouder zijn dan 50 en die risico lopen op het ontwikkelen van kankertumoren, moeten ook periodiek de test ondergaan. De analyse wordt uitgevoerd wanneer een tumor wordt gedetecteerd waarvan de aard onduidelijk is. Het biedt de mogelijkheid om te bepalen of een tumor goedaardig of kwaadaardig is. De analyse wordt ook uitgevoerd om de resultaten in de dynamiek bij kankerpatiënten bij te houden, om de effectiviteit van de behandeling te controleren.

trusted-source[1], [2], [3], [4], [5], [6], [7], [8], [9], [10]

Voorbereiding

Analyse voor oncomarkers vereist geen speciale voorbereiding. Het enige dat nodig is, is om de aanwijzingen van de dokter te nemen. Laat dan 2-3 dagen voor de test een licht dieet volgen (geen alcohol drinken, gekruid, vet, gerookte gerechten, kruiden). U moet de analyse op een lege maag geven. De laatste maaltijd moet 8 uur vóór de test zijn. Om 's morgens te drinken is het onmogelijk om ook te roken. Gedurende meerdere dagen, overbelast het lichaam niet, sluit fysieke arbeid uit.

trusted-source[11], [12], [13], [14], [15], [16], [17], [18], [19], [20], [21], [22]

Met wie kun je contact opnemen?

Techniek analyse voor kankercellen

Er zijn veel technieken. Het hangt allemaal af van het soort onderzoek. Als een bloedtest wordt uitgevoerd om kankermarkers te bepalen, wordt deze uitgevoerd met immunoassaymethoden. Deze methode is gebaseerd op de agglutinatiereactie, waarbij de marker van een oncologische tumor werkt als een vreemd agens voor het lichaam (antigeen). Het immuunsysteem reageert er onmiddellijk op en produceert een antilichaam. Het effect van antilichamen is gericht tegen de vernietiging van een buitenaards organisme en de verdere uitscheiding ervan. Het antilichaam vindt een antigeen, dat een marker is van een kankerachtige tumor, valt het aan en stimuleert vernietiging. In de loop van dit gevecht komen het antigeen en het antilichaam samen, een agglutinatiereactie treedt op. Het zijn deze complexen die worden gevonden tijdens de analyse wanneer antilichamen in het bloed worden geïnjecteerd.

Hiervoor neemt de patiënt het bloed in de juiste hoeveelheid. Verschillende druppels heparine worden toegevoegd om stolling te voorkomen. Vervolgens wordt het bloed aan het laboratorium afgeleverd. Daar is het bloed verdeeld in breuken. Afzonderlijk wordt het bloedserum geïsoleerd, omdat oncomarkers in het serum worden aangetroffen. Hiervoor wordt centrifugatie gebruikt. Met behulp van een speciaal apparaat - een centrifuge - wordt het bloed in de buis geroteerd met een groot aantal omwentelingen. Als gevolg hiervan vormen alle bloedcellen zich op de bodem, alleen het serum bevindt zich in de reageerbuis. Met haar, en voer verdere manipulatie uit.

Neem een speciale kit voor analyse (ELISA), een bepaalde hoeveelheid bloedserum wordt toegevoegd aan de onderkant van de cel. Voeg een speciaal antilichaam voor de kanker toe. Wacht een paar uur. Als er een complexatiereactie plaatsvindt, waarbij antistoffen en antigenen samensmelten, betekent dit dat er een antigeen in het bloed zit dat fungeert als een oncomarker die de aanwezigheid van een kankerachtige tumor aangeeft. De vorming van antigeen-antilichaamcomplexen kan met het blote oog worden waargenomen, omdat troebelheid en een neerslag in de vorm van vlokken in de buis verschijnen. Door de mate van troebelheid kan men het aantal oncolomeren beoordelen. Maar voor de nauwkeurigheid van de resultaten worden speciale metingen gedaan. Gebruik een internationale troebelheidstandaard of een spectrofotometer, die, uitgaande van de brekingshoek van licht dat door de oplossing passeert, de concentratie bepaalt en het eindresultaat geeft.

Er is een andere methode - de immunomagnetische scheiding van bloedfracties. Voor dit doel wordt een speciaal apparaat gebruikt dat het mogelijk maakt kankercellen te detecteren door oncomarkers te bepalen die zich hechten aan de veranderde cel en zichtbaar worden in het magnetisch veld. De nauwkeurigheid van deze methode is vrij hoog - zelfs van een miljoen gezonde cellen kan men één kanker detecteren.

Met behulp van dergelijke analyses is het ook mogelijk om het exacte aantal kankercellen vast te stellen, de snelheid van hun verspreiding en de dynamiek van de groei te voorspellen. Het voordeel van deze assays is ook dat ze het mogelijk maken om het verloop van de behandeling te volgen, de effectiviteit van therapie te bepalen en ook om de geneesmiddelen en hun optimale dosering met hoge nauwkeurigheid te selecteren. De nauwkeurigheid van de dosering tijdens de behandeling speelt een hoofdrol, omdat deze effectief complicaties kan bestrijden, het aantal kankercellen kan verminderen en de ontwikkeling van metastasen kan voorkomen. Bovendien vermindert deze dosering op correcte wijze het toxische effect van geneesmiddelen voor het lichaam.

Er is ook een methode voor het bestuderen van het biopsiepreparaat, waarbij een stukje weefsel wordt genomen voor het onderzoek. Vervolgens wordt een cytologisch en histologisch onderzoek uitgevoerd. Analyse van cytologie omvat de bereiding van een micropreparatie van het resulterende weefselmonster voor verdere studie van de eigenschappen ervan onder een microscoop. De belangrijkste morfologische, anatomische eigenschappen worden bestudeerd. De micropreparatie van een steekproef van gezond weefsel verschilt sterk van die van een kankergezwel. Er zijn bepaalde verschillen in structuur, uiterlijk en optredende intracellulaire processen. Kanker kan ook worden aangegeven door speciale insluitsels.

Bij een histologisch onderzoek wordt het weefsel gezaaid naar speciale voedingsmedia die zijn ontworpen om een weefselcultuur te laten groeien. Binnen 7 dagen wordt het gewas gekweekt onder speciale omstandigheden, waarna het karakter van de tumorgroei, snelheid en richting worden gevolgd. Dit heeft een belangrijke diagnostische betekenis.

Bloedonderzoek voor kankertumoren

De snelste manier om een oncologische aandoening te bepalen, is door een bloedtest uit te voeren. Een dergelijk onderzoek wordt binnen 1-2 dagen uitgevoerd en indien nodig kunnen dringende resultaten binnen 3-4 uur worden verkregen. Dit is een uitdrukkelijke methode, die nog steeds aanvullende verfijningsstudies vereist. Om echter een voorlopige diagnose en nauwkeurige identificatie van de tumor te verkrijgen, is dit voldoende. De analyse maakt het mogelijk om zelfs de exacte locatie van de tumor en de fase van het oncologische proces te bepalen.

Het materiaal van de studie is het bloed van de patiënt. De analyse wordt 's ochtends op een lege maag uitgevoerd. Het wordt voornamelijk gebruikt om de diagnose te bevestigen of te weerleggen, het maakt het mogelijk om een goedaardige tumor te onderscheiden van een kwaadaardige tumor. Het wordt ook gebruikt voor het monitoren van indicatoren in de dynamiek om de effectiviteit van de behandeling te bepalen, de tumorstatus te bewaken en terugvallen te voorkomen.

Het principe van de methode is om de belangrijkste antigenen te bepalen die worden geproduceerd door kankercellen tijdens de ontwikkeling van de tumor. Wanneer ze worden gedetecteerd, kun je nauwkeurig zeggen dat een persoon kanker heeft. Als dergelijke onkomers echter niet worden gevonden, wordt geen negatief resultaat gegeven. In dit geval worden aanvullende onderzoeken voorgeschreven.

De lokalisatie van de tumor kan worden bepaald door het type oncomarker. Detectie van het antigeen CA19-9 van de patiënt in het bloed van de patiënt, er is sprake van alvleesklierkanker. De marker van CEA geeft de lokalisatie van de tumor in de darmen, lever, nieren, longen en andere inwendige organen aan. Als CA-125 wordt gevonden, duidt dit op een oncologisch proces in de eierstokken of aanhangsels. Markers van PSA en CA-15-3 wijzen respectievelijk op prostaat- en borstkanker. CA72-3 geeft maagkanker en longkanker aan, B-2-MG geeft leukemie, leukemie, myeloom aan. Bij leverkanker en uitzaaiingen verschijnt een ACE. De bloedtest is niet de enige factor die de methode bevestigt. Het moet worden gebruikt in combinatie met vele andere factoren.

trusted-source[23], [24], [25], [26], [27], [28], [29]

Analyse voor kankercellen van de baarmoederhals

Kankercellen van de baarmoederhals kunnen worden bepaald door een bloedtest, die gericht is op het identificeren van de oncomarker. In de regel wordt in dergelijke gevallen REA of kanker-embryonaal antigeen gevonden. Neem ook voor het onderzoek een staafje uit de vagina, de baarmoederhals. Eerst wordt een voorlopig cytologisch onderzoek uitgevoerd. In de loop van de analyse van cytologie is het mogelijk om getransformeerde cellen en specifieke insluitsels die op oncologische processen duiden, te detecteren.

Hierna wordt indien nodig een biopsie uitgevoerd, waarbij een stuk weefsel wordt afgenomen voor onderzoek. Het wordt gezaaid op voedingsbodems, geïncubeerd, waarna de belangrijkste morfologische en biochemische eigenschappen worden bestudeerd. Op basis van de verkregen gegevens wordt een oordeel gegeven over de aard van de tumor, de mate van ontwikkeling ervan en de concentratie van kankercellen.

trusted-source[30], [31], [32], [33], [34], [35], [36], [37], [38], [39], [40], [41], [42]

Analyse voor kanker embryonaal antigeen

Het is een antigeen dat wordt gebruikt voor de diagnose en behandeling van kanker van de maag, darmen, rectum, vrouwelijke voortplantingsorganen en borstklieren. Bij een volwassen man in kleine hoeveelheden geproduceerd door bronchiën en longen, aangetroffen in veel biologische vloeistoffen en geheimen. De indicator is het aantal, dat sterk toeneemt met de oncologie. Men mag niet vergeten dat de hoeveelheid kan worden verhoogd bij mensen die lijden aan auto-immuunziekten, tuberculose, goedaardige tumoren en zelfs bij rokers. Daarom is de detectie van een hoge concentratie van deze markers (20 ng / ml en hoger) slechts een indirecte bevestiging van kanker en is het noodzakelijk om een aantal aanvullende onderzoeken uit te voeren. Ook moet deze indicator in de dynamiek worden gevolgd om volwaardige conclusies te kunnen trekken. Veneus bloed dient als materiaal voor de studie. Het antigeen wordt gedetecteerd in serum.

trusted-source[43], [44], [45], [46], [47], [48], [49], [50]

Analyse voor de mutatie van kankercellen

Onder de epidermale groeifactorreceptor wordt een transmembraanreceptor verstaan die een interactie aangaat met extracellulaire liganden van epidermale groeifactoren. Neemt deel aan de vorming van kankerachtige tumoren van vele organen, in het bijzonder is een betrouwbaar teken van longkanker. Het is een feit dat, in de norm, de belangrijkste genen gericht zijn op het verschaffen van controle over de groei en vermenigvuldiging van lichaamscellen. De cellen groeien, vermenigvuldigen zich tot een bepaalde limiet, waarna het gen de beëindiging van verdere reproductie aangeeft en de cellen niet langer delen.

Ook controleert het gen het proces van apoptose - het tijdig afsterven van oude, verouderde cellen. Met mutaties in de genen stoppen ze met het beheersen van proliferatie (proliferatie) en dood (apoptose), ze signaleren een continue groei, waardoor de cellen onbeperkt en constant groeien, ongecontroleerd delen. Dit leidt tot de vorming van een kankergezwel, dat wordt gekenmerkt door het vermogen voor onbeperkte groei. In de meest primitieve vorm kan kanker worden voorgesteld als ongecontroleerde verdeling en onsterfelijkheid van de cel. Ook wordt het proces beschouwd als het onvermogen van een cel om op tijd te sterven.

Chemotherapie en verschillende antitumormiddelen zijn precies gericht op de vernietiging en inactivatie van dit gen. Als de remming van zijn activiteit succesvol is, kan de ontwikkeling van kanker worden gestopt. Maar gedurende de lange jaren van behandeling met dergelijke doelgerichte preparaten is het gen, zoals in elk organisme, aangepast en is het resistent geworden tegen een aantal middelen.

Daarna werden de geneesmiddelen verbeterd, hun formule veranderd, ze werden opnieuw actief tegen dit gen. Maar het gen zelf wordt verbeterd: het is ook herhaaldelijk gemuteerd en produceert keer op keer resistentie tegen geneesmiddelen. In de loop van de jaren hebben zich meer dan 25 verschillende soorten mutaties van dit gen opgehoopt. Dit houdt ineffectiviteit van specifieke therapie in. Om geen tijd te verspillen aan nutteloze behandeling, die niet effectief zal zijn, wordt een analyse uitgevoerd om de mutatie van het gen te bepalen.

De detectie van mutaties in het KRAS-gen geeft bijvoorbeeld aan dat de behandeling van long- en dikke darmkanker met tyrosinekinaseremmers niet effectief zal zijn. Als mutaties in het ALK- en ROS1-gen worden gedetecteerd, betekent dit dat het nodig is om cryotinib voor te schrijven, wat dit gen snel en effectief remt en de verdere ontwikkeling van de tumor voorkomt. Het gen BRAF leidt tot de vorming van melanoomtumoren.

Tegenwoordig zijn er medicijnen die de activiteit van dit gen kunnen blokkeren en de installatie kunnen veranderen in onbeperkte groei. Dit leidt ertoe dat de tumor de groei vertraagt of stopt met groeien. In combinatie met antitumor medicijnen kunt u significante resultaten bereiken in de behandeling, tot een vermindering van de tumorgrootte.

trusted-source[51], [52], [53], [54], [55], [56], [57], [58], [59]

Ontlastingstest voor kankercellen

Meestal bestaat de essentie van de analyse uit het vinden van verborgen bloed in de ontlasting. Dit teken kan wijzen op de aanwezigheid van een oncologisch proces in de dikke darm of het rectum. Mensen ouder dan 45-50 jaar die het grootste risico lopen tumoren te ontwikkelen, is het noodzakelijk om deze analyse jaarlijks te maken. Dit kan wijzen op andere pathologieën, maar dan is het noodzakelijk om aanvullende onderzoeken uit te voeren voor differentiële diagnose. Dit is een vroege diagnosemethode, die het mogelijk maakt om de tumor te identificeren in het stadium van zijn oorsprong en om maatregelen voor de behandeling te nemen. Vaak kan deze methode zelfs een precancereuze toestand detecteren.

Biopsie op kankercellen

Deze studie, die de meest accurate en betrouwbare resultaten oplevert. Het bestaat uit twee fasen. In de eerste fase wordt biologisch materiaal verzameld voor verder onderzoek. Het materiaal is een stuk weefsel dat rechtstreeks uit het orgaan wordt genomen waarin de tumor is gelokaliseerd. In feite snijdt de arts met behulp van speciale technieken en gereedschappen een deel van de tumor af en geeft deze door voor nader onderzoek naar het laboratorium. Het hek wordt meestal gemaakt met behulp van lokale anesthesie.

In de tweede fase ondergaat het biologische materiaal verder cytologisch en histologisch onderzoek. In de cytologische studie wordt een micropreparatie voorbereid en de studie ervan wordt onder een microscoop uitgevoerd. Volgens het algemene beeld, het uiterlijk, de aard van de insluitsels, is het mogelijk om een eerste inleiding te maken of de tumor goedaardig of kwaadaardig is. Deze fase duurt niet langer dan 30 minuten.

Daarna wordt het weefsel gedrenkt en geënt in een speciaal voedingsmedium, dat alle voorwaarden voor celgroei bevat. De kweek wordt in optimale omstandigheden, in een incubator, een maand bewaard. De studie is vrij lang en wordt bepaald door de snelheid van celgroei. Als het een kankergezwel is, begint het actief te groeien. Goedaardige, niet-kankerachtige groei doet dat niet. Om de groei te versnellen, kunnen we groeifactoren toevoegen die de tumorgroei verder stimuleren. In dit geval kunnen de resultaten binnen 7-10 dagen worden verkregen.

De rijpe tumor wordt onderworpen aan verdere biochemische, microscopische onderzoeken en produceert uiteindelijk het resultaat in de vorm van een einddiagnose waarin het type tumor, het stadium, de prevalentie en de richting van de tumorgroei worden bepaald. Dit is meestal de definitieve versie, die het resultaat met 100% nauwkeurigheid bepaalt.

trusted-source[60], [61], [62], [63], [64], [65], [66], [67]

Normale prestaties

Als er een analyse wordt gemaakt voor de definitie van oncomarkers, is het vrij eenvoudig om de analyse te ontcijferen. In aanwezigheid van kanker worden oncomarkers in het lichaam aangetroffen. In een gezond organisme zijn er geen tumormarkers, omdat ze alleen door kankercellen worden geproduceerd. Een uitzondering is het kanker-embryonale antigeen, dat normaal in minimale hoeveelheden in het lichaam aanwezig is. Een lichte toename in concentratie kan wijzen op een verscheidenheid aan somatische pathologieën, en slechts een scherpe toename, boven 20 ng / ml, duidt op een kankergezwel. Bovendien, door welk antigeen het wordt gevonden, is het mogelijk om de lokalisatie van de tumor te beoordelen. Elk orgaan produceert zijn eigen type markers.

Ontcijfer de resultaten van de biopsie is nog eenvoudiger. Als er een groei van cellen op het voedingsmedium is - de tumor is kwaadaardig, als er geen groei is, is het goedaardig.

Norm van analyse voor kankercellen

Er zijn geen eenduidige indicatoren voor alle soorten kanker. Elke specifieke oncomarker heeft zijn eigen normale waarden. Bovendien variëren ze aanzienlijk, afhankelijk van de leeftijd en fysiologische kenmerken van een persoon.

Over het algemeen kunnen de volgende indicatoren worden gepresenteerd:

  • 0-1ng / ml - de norm;
  • 1-20 - goedaardige tumor, precancereuze toestand, somatische pathologieën;
  • 20-30 - een kankergezwel;
  • Meer dan 30 - metastasen.

Men moet niet vergeten dat elke tumor, zelfs goedaardig, zich tot een kwaadaardige kan ontwikkelen. De afwezigheid van oncomarkers duidt niet altijd op de afwezigheid van kanker. Dit is een excuus voor verder onderzoek.

trusted-source[68], [69], [70], [71], [72], [73], [74], [75], [76], [77]

Het apparaat voor analyse

Voor de analyse is de complexe technologische uitrusting van het laboratorium vereist. Het detecteren specifieke tumormarkers behoefte aan immunoassay kits, laboratorium waren, dispensers micropipet centrifuge, een incubator, cultivator, spectrofotometer of een massaspectrometer voor het meten van de optische dichtheid immunomagnetische scheidingsteken.

Voor het uitvoeren van cytologisch, microscopisch, histologisch onderzoek is een microscoop met hoge resolutie vereist. Voor histologie heb je een stoombad, een autoclaaf, een droge oven, een thermostaat, een incubator, een exsiccator en een zuurkast nodig.

Hoeveel analyses worden er uitgevoerd voor kankercellen?

Identificatie van oncomarkers is een uitdrukkelijke methode waarmee u voorlopige resultaten kunt verkrijgen en de diagnose kunt bevestigen of ontkennen. Het is snel genoeg gedaan - 1-2 dagen, indien nodig, kan worden versneld tot 3-4 uur.

De meest betrouwbare en nauwkeurige analyse voor kankercellen is een biopsie waarmee u een definitieve diagnose kunt stellen. Een dergelijke analyse wordt uitgevoerd van 14 tot 28 dagen (afhankelijk van de groeisnelheid van de celkweek). Indien nodig kunt u tot 7-10 dagen versnellen door speciale incubatieomstandigheden te creëren, waarbij groeifactoren worden toegevoegd.

Translation Disclaimer: For the convenience of users of the iLive portal this article has been translated into the current language, but has not yet been verified by a native speaker who has the necessary qualifications for this. In this regard, we warn you that the translation of this article may be incorrect, may contain lexical, syntactic and grammatical errors.

You are reporting a typo in the following text:
Simply click the "Send typo report" button to complete the report. You can also include a comment.