Bence-Jones eiwit

De urine van een gezond persoon bevat geen Bence-Jones-eiwit, een eiwit in de vorm van lichte ketens van immunoglobulinen die worden gedetecteerd als gevolg van de vorming van kwaadaardige tumoren.

Laboratoriumtests op de aanwezigheid van specifieke eiwitten met een laag moleculair gewicht zijn noodzakelijk voor de diagnose van een aantal pathologische aandoeningen (meestal problemen met het β-immuunsysteem) en om de effectiviteit van de gebruikte therapie te bepalen.

In overmaat wordt Bence-Jones-eiwit geproduceerd door plasmacellen, verplaatst het zich met de bloedbaan en wordt het uitgescheiden via de urine. Deze laatste eigenschap van eiwitlichamen maakt het mogelijk om de volgende ziekten te vermoeden bij urineonderzoek:

• myeloom;
• osteosarcoom;
• plasmacytoom;
• chronische lymfatische leukemie;
• lymfogranulomatose;
• primaire amyloïdose;
• macroglobulinemie;
• idiapathische monoklonale gammopathie.

Klinisch is bevestigd dat er een verband bestaat tussen de afgifte van een specifiek eiwit en de daaropvolgende nierfunctiestoornis, die wordt veroorzaakt door het toxische effect van eiwitlichamen op de epitheelstructuren van de nierbuisjes. Dit effect leidt op zijn beurt tot dystrofie, het syndroom van Fanconi en renale amyloïdose.

[ 1 ], [ 2 ], [ 3 ], [ 4 ], [ 5 ], [ 6 ], [ 7 ], [ 8 ], [ 9 ]

Bence Jones-eiwit in de urine

De aanwezigheid van eiwit in de urine wordt proteïnurie genoemd. Onder prerenale proteïnurie wordt de aanwezigheid van een grote hoeveelheid laagmoleculair eiwit in de urine verstaan. In dit geval is er geen schade aan het nierfilter en de niertubuli en is de normale nierfunctie niet in staat de reabsorptie van eiwitlichamen te garanderen. Extrarenale (valse) proteïnurie, d.w.z. zonder nierfunctiestoornis, duidt op de aanwezigheid van een infectieus of kwaadaardig proces in het lichaam. Proteïnurie wordt waargenomen bij 60-90% van de patiënten met myeloom. Ongeveer 20% van de pathologische aandoeningen betreft Bence-Jones-myeloom.

Bence-Jones-eiwit in urine wordt gedifferentieerd door humorale verschuivingen in het β-immuunsysteem. De aanwezigheid van eiwitlichaampjes wordt geassocieerd met myeloompathologie, paraproteïnemische hemoblastosen, endotheliose, macroglobulinemie van Waldenström, lymfatische leukemie en osteosarcomen. Detectie van Bence-Jones-eiwit in urine is een belangrijke diagnostische en prognostische stap. Door het lage molecuulgewicht wordt Bence-Jones-eiwit uitgescheiden in de urine, wat leidt tot schade aan het epitheel van de niertubuli, wat leidt tot de ontwikkeling van nierfalen en de dood. Tijdige classificatie van het eiwit naar type is ook belangrijk: λ-eiwit heeft een sterker nefrotoxisch effect dan κ-eiwit.

[ 10 ], [ 11 ], [ 12 ], [ 13 ], [ 14 ]

Bence Jones-eiwittest

De aanwezigheid van andere eiwitlichamen dan serum in de urine wijst op lymfatische leukemie, osteosarcoom of myeloom (tumoruitlopers van het beenmerg). Wanneer het urinefiltraat wordt verhit tot 45-60 °C, slaat het Bence-Jones-eiwit neer als een troebel sediment dat zich afzet op de wanden van de reageerbuis. Een verdere temperatuurstijging tot kookpunt lost de afgescheiden troebelheid op.

De kwantitatieve analyse voor Bence Jones-eiwit wordt als volgt uitgevoerd:

• met een deel water en een deel salpeterzuur als reagens;
• het plaatsen van salpeterzuur (0,5-1 ml) in een reageerbuis met daarop in lagen dezelfde hoeveelheid urine die getest moet worden;
• Evaluatie van het resultaat na 2 minuten (het verschijnen van een dunne ring aan de grens van het vloeibare medium geeft aan dat er 0,033% proteïnelichamen aanwezig zijn).

Om een draadvormige ring te zien, moet de urine worden verdund met water in een verhouding van 1:1. Het verschijnen van een dikke ring geeft aan dat een deel van de urine moet worden gemengd met drie delen water. In het geval van een compacte ring wordt een deel van de urine verdund met zeven delen water. Bovendien wordt de verdunning voortgezet totdat het karakteristieke sediment in de 2-3e minuut van de test verschijnt.

De hoeveelheid eiwit wordt berekend door 0,033% te vermenigvuldigen met de verdunningswaarde. Bijvoorbeeld: urine werd 10 keer verdund en de ring van eiwitlichaampjes verscheen aan het einde van de derde minuut van het onderzoek. Het percentage eiwitinsluiting wordt dan als volgt berekend: 0,033 x 10 = 0,33.

Als er geen sediment aanwezig is, wordt de mate van troebelheid beoordeeld: duidelijke, zwakke of nauwelijks waarneembare sporen van troebelheid.

[ 15 ], [ 16 ], [ 17 ], [ 18 ], [ 19 ]

Bence Jones-eiwitsecretie

Afhankelijk van het type uitgescheiden immunoglobuline wordt onderscheid gemaakt tussen:

• lichtketenpathologieën (Bence Jones-eiwitsecretie);
• glomerulopathie (uitscheiding van andere immunoglobulinen).

Verschillende combinaties van nierschade zijn ook mogelijk. Zoals de praktijk laat zien, is nefropathie een gevolg van lymfoproliferatieve pathologie (multipel myeloom, chronische lymfatische leukemie, de ziekte van Waldenström, enz.).

Bij afgifte in de bloedbaan omzeilen lichte ketens, net als alle eiwitten met een molecuulgewicht tot 40 kDa, de nierfilter en worden ze vervolgens via lysosomen afgebroken tot oligopeptiden en aminozuren. Een teveel aan lichte ketens leidt tot een verstoring van de katabolische reactie en mogelijke afgifte van lysosomale enzymen, wat leidt tot necrose van het tubulaire weefsel. Eiwitlichamen leiden tot het onvermogen om te resorberen, en wanneer monoklonale lichte ketens zich verbinden met Tamm-Horsfall-eiwit, worden er eiwitcilinders gevormd in de distale tubuli.

Bence Jones-eiwit bij myeloomziekte

Multipel myeloom is een pathologische aandoening waarbij het lichaam lichte immunoglobulineketens produceert in plaats van volwaardige. De diagnose en monitoring van de aandoening worden uitgevoerd door middel van laboratoriumonderzoek van urine, waarbij de hoeveelheid eiwitlichamen wordt gemeten. De specificatie van het subtype myeloom is gebaseerd op de analyse van bloedserum. Klinische symptomen van de ziekte zijn onder andere: botpijnsyndroom, urinedisfunctie, hematomen van onbekende oorsprong en vochtretentie in het lichaam.

Het Bence-Jones-eiwit bij myeloom wordt gedetecteerd met behulp van standaardtests die de hoeveelheid eiwitlichamen aantonen en de mate van nierschade beoordelen. Identificatie van het eiwit in de urine verklaart de schade aan het epitheel met sclerose van het nierstroma, wat na verloop van tijd leidt tot nierfalen - een veelvoorkomende doodsoorzaak als gevolg van myeloomschade (het Bence-Jones-eiwit verstopt de niertubuli volledig, waardoor urineren onmogelijk wordt).

Statistische gegevens tonen aan dat myeloom zich vooral voordoet bij mannen ouder dan 60 jaar, die een genetische aanleg hebben, lijden aan obesitas en immunosuppressie en die zijn blootgesteld aan giftige en radioactieve stoffen.

[ 20 ], [ 21 ], [ 22 ], [ 23 ], [ 24 ]

Bepaling van het Bence Jones-eiwit

Om een specifiek eiwit te differentiëren, wordt een laboratoriumonderzoek uitgevoerd naar de gemiddelde hoeveelheid ochtendurine (een volume van minimaal 50 ml is vereist). De aanwezigheid van Bence-Jones-eiwit en de kwantitatieve component kunnen worden bepaald met behulp van immunofixatie. Eiwitscheiding vindt plaats door middel van elektroforese, gevolgd door immunofixatie met behulp van speciale sera. Bij binding van het eiwit aan antilichamen van lichte en zware ketens van immunoglobulinen ontstaan immuuncomplexen, die door middel van kleuring worden vastgesteld.

Opgemerkt moet worden dat zelfs de minimale eiwitconcentratie wordt gedetecteerd dankzij de neerslagreactie op sulfosalicylzuur. Bence-Jones-eiwit wordt bepaald door gefilterde urine (4 ml) te combineren met acetaatbuffer (1 ml). Vervolgens verhitten tot 60 °C in een waterbad en dit 15 minuten laten staan met een positief monster, levert een karakteristiek sediment op. Deze methode wordt als de meest betrouwbare beschouwd. Een te zure of basische omgeving en een lage relatieve dichtheid van urine kunnen de analyseresultaten negatief beïnvloeden.

Onderzoeksmethoden waarbij Bence-Jones-eiwit wordt opgelost door verhitting tot 100 °C of weer neerslaat na afkoeling, zijn onbetrouwbaar, omdat niet alle eiwitelementen de overeenkomstige eigenschappen hebben. Het gebruik van indicatorpapier is echter volstrekt ongeschikt voor het detecteren van Bence-Jones-eiwit.

[ 25 ], [ 26 ], [ 27 ], [ 28 ], [ 29 ], [ 30 ]